Determination of Plant Tissue Water Potential   

材料与试剂

1. 过滤接头
   
2. 橡胶密封垫
   
3. 金属垫片
   
4. 水稻叶片
   

仪器设备

1. 压力室水势测定仪
   
2. 贮气瓶
   
3. 放大镜
   
4. 仪器台
   
5. 夹样器
   
6. 钢筒
   

实验步骤

1. 仪器的准备
   用高压金属软管通过过滤接头把贮气瓶与水势测定仪连接好。打开仪器箱，取下压力室盖，按测定材料的需要安装好相应大小的孔金属垫片和橡胶密封垫，放在仪器台上的凹陷处。关闭进气阀和排气阀。
   
2. 取样和装样
   依实验要求选取一定部位的叶子,迅速插入夹样器，固定到密封垫上，使样品切口仅从夹样器中心伸露出3-5毫米左右，顺时针方向旋转汽封旋钮，直到密封垫将样品挤紧。将固定好祥品的夹样器放入钢筒内，用两手的拇指分别按在夹样器的两侧，将其向下推进钢筒内，然后顺时针方向旋转夹样器45度，把夹样器锁定在钢筒凸轮之下。
   
3. 加压测定
   旋转控制阀到“加压”位置上，逆时针方向慢慢打开计量阀，观察压力表读数，通过调节计量阀将压力增加的速度控制在每秒钟0.3-0.5bar范围内。用放大镜仔细观察样品末端切口的变化,当样品末端切口由于汁液上升呈现湿润时立即关闭进气阀，此点上的压力读数即为被测样品水势的绝对值。读数结束后，将控制阀旋转到“排气”位置，放气，压力表指针退回至零。将夹样器逆时针方向旋转45度，从钢筒内拔出并将样品取下，再进行第二个样品的测定。
   
4. 结果分析
   叶片末端切口呈现湿润时读取所加压力值，将读数取负数后即为被测样品的水势值。
   

注意事项

1. 压力室盖一定要关闭到位。测量完后要排放完压力室内的气体，方可打开室盖更换样品。
   
2. 在测定过程中，样品失水会带来很大误差，装样时速度要快，最好在30秒钟以内完成。
   
3. 装样时气封旋钮不要旋得过紧，以不漏气即可，过紧会压伤植物组织。对不同的植物组织选择不同形状和不同硬度的密封垫，以既不漏气又不夹伤植物组织为宜。
   
4. 在测定一批样品过程中，计量阀应置于一固定位置上，以便使所有样品受到同样的加压速度。因为加压速度影响读数，加压速度过快会因传导滞后效应使得到的水势的绝对值偏高。
   
5. 观察样品切口汁液出现的标准，直接影响到测定结果的准确与否。一定要在刚刚看到样品切口变湿润时，立即停止加压并读数，此时必须精力十分集中。如切口处出现汁液小滴，说明压力已经超过，测得的值要大于叶片原来水势的绝对值。
   
6. 供加压用的气体为氮气，如果含二氧化碳或氧气太多会对细胞有害，影响结果。
   
7. 注意安全，加压切勿超过所许可的范围，加压时不要使脸部或手处于钢筒顶盖的上方。经常检查安全降压阀；压力室及高压气罐要轻搬轻放。