摘要:嵌合抗原受体T细胞 (CAR-T),是通过基因工程手段进行修饰的T细胞。胞外区含有不受MHC限制的单链可变区 (scFv),可特异识别抗原 (如CD20等);胞内区含有共刺激结构域 (CD28,4-1BB等) 和第一信号激活结构域 (CD3ζ),进行信号传递 (Eshhar等,1993;Sadelain等,2013)。CD20 CAR-T可特异的识别并杀伤表达CD20的人B淋巴瘤细胞系Raji (Kowolik等,2006)。在体外,CD20 CAR-T与靶细胞Raji以不同比例共培养24小时,使用不同抗体分别标记CAR-T细胞和靶细胞,通过流式细胞技术确定CD20 CAR-T杀伤功能。
关键词: CAR-T, 靶细胞, 流式细胞技术, T细胞杀伤
材料与试剂
仪器设备
软件
实验步骤
结果与分析
图1. CAR-T细胞体外杀伤流式检测
注意事项
溶液配方
致谢
感谢杨选明实验室全体成员的建议和帮助。该研究受国家自然基金 (81671643)、科技部重点研发计划 (2016YFC1303400) 资助。
参考文献
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