摘要:葡聚糖硫酸钠 (dextran sulphate sodium,DSS) 是葡聚糖的聚阴离子衍生物,已被广泛用于建立结肠炎的动物模型。给果蝇喂食DSS同样能诱导果蝇肠道炎症和损伤,随后激活肠道干细胞加速肠道上皮增生和修复。DSS诱导的肠道损伤和再生模型为研究干细胞的调控及上皮的再生机制提供了一个相对简单的实验动物模型。
关键词: 果蝇, 肠上皮, DSS, 再生
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
结果与分析
本实验方法参考Amcheslavsky等 (2009) 和Chen等 (2016b) 发表的论文。果蝇肠道是由平滑肌围裹的单层管状上皮结构构成。果蝇的肠腔由内到外分别为围食膜、肠上皮层、基底膜和平滑肌层。肠道细胞中的多功能肠道干细胞 (intestinal stem cells,ISCs)通过有丝分裂产生新的干细胞和子代细胞,称之为肠母细胞或中间过渡型细胞 (enteroblast,EB)。EB细胞进一步分化成具有营养吸收功能的肠上皮细胞 (enterocytes,ECs) 和肠内分泌细胞 (enteroendocrine cell,EE),两者分别由Pdm1和Prospero蛋白标记。EC细胞占肠道总细胞数量的90%,是多倍体细胞,具有较大的细胞核。ISC和EB细胞 (统称为前体细胞) 以及EE细胞为二倍体,具有较小的细胞核。 DSS处理的果蝇后两天与对照组比较能观察到esg (esgGal4, UAS-GFP) 表达的细胞 (ISC和EB) 增多,显微镜下GFP阳性细胞相对数量会显著增多 (图1)。 图1. DSS处理的果蝇肠道ISC和EB细胞增多
注意事项
溶液配方
致谢
感谢金真为本文提供图片。
参考文献
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