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水稻细胞超微结构的透射电镜观察

Ultrastructure Obeservation of Rice Cells by Transmission Electron Microscopy

曹 曹剑波
程 程珂
袁猛 袁猛

发表时间: 2018年05月30日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010145 浏览次数: 7153

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实验原理：根据固定剂和包埋剂对水稻细胞结构的原位固定和保存，利用高分辨率的透射电子显微镜对水稻细胞进行成像和观察。
实验目的：可以观察水稻细胞的超微结构、亚细胞器 (细胞核、叶绿体、线粒体、内质网、过氧化酶体及其他质体) 的结构。

Keywords: 透射电镜 search 超微结构 search 水稻细胞 search

材料与试剂

  1. 2 ml离心管
  2. 吸管
  3. 注射器
  4. 牙签
  5. 细毛笔
  6. 滤纸
  7. NaH2PO4·2H2O
  8. Na2HPO4·12H2O
  9. 戊二醛
  10. 锇酸
  11. Epon812 (SPI, USA)
  12. DDSA
  13. NMA
  14. DMP-30
  15. 醋酸铀
  16. 硝酸铅Pb(NO3)2 
  17. 柠檬酸三钠 (Na2C6H5O7·2H2O)
  18. 氢氧化钠
  19. 丙酮 (国药试剂)
  20. 固定剂 (见溶液配方)
  21. 0.1 M pH 7.2 PBS缓冲液 (见溶液配方)
  22. 脱水剂 (见溶液配方)
  23. 包埋剂 (见溶液配方)
  24. 染色液 (见溶液配方)
    1)
    醋酸铀染液
    2)
    柠檬酸铅染液

仪器设备

  1. 烘箱 (温度范围25-100 °C，国产)
  2. 磁力搅拌器 (国产)
  3. 干燥器 (国产)
  4. 冰箱
  5. 玻璃刀制刀机 (Leica KMR3，Germany)
  6. 钻石刀 (超薄级，DiTOME，Switzerland)
  7. 超薄切片机 (Leica UC6，Germany)
  8. 透射电子显微镜 (H-7650，Japan)
  9. 用具：手术剪刀、眼科镊子、量筒、烧杯、包埋模具、酒精灯、玻璃条、铜网、铜网镊子

实验步骤

Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：曹剑波, 程珂, 袁猛. (2018). 水稻细胞超微结构的透射电镜观察. Bio-101: e1010145. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010145.
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How to cite: Cao, J. B., Cheng, K. and Yuan, M. (2018). Ultrastructure Obeservation of Rice Cells by Transmission Electron Microscopy. Bio-101: e1010145. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010145.
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分类

植物科学 > 植物细胞生物学 > 细胞成像

细胞生物学 > 细胞成像 > 固定细胞成像

细胞生物学 > 细胞成像 > 电子显微镜

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