实验原理:来自萤火虫的荧光素酶(Firefly luciferase, LUC)可以分成N和C两段蛋白质而没有酶活,将N和C端各融合另外的两个蛋白质,如果这两个蛋白质在体内可以互作的话,那么LUC的N和C端将在空间上靠近而恢复酶活,因此可以通过检测分段的LUC可否恢复酶活而判断两个蛋白质之间在体内是否存在相互作用。 实验目的:检测蛋白质之间的体内相互作用。
关键词: 蛋白质互作, 荧光素酶, 体内验证
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
注意事项
致谢
感谢中国科学院遗传与发育生物学研究所周俭民研究员提供载体PUC19-nLUC和PUC19-cLUC;感谢中国科学院植物研究所林荣呈研究员在荧光素酶酶活测定体系建立方面所提供的帮助。
参考文献
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