摘要:中国白酒是世界六大蒸馏酒之一,其酿造过程独特,涉及多种微生物的相互作用及代谢。白酒酿造环境已经成为一种我国独有的特殊生态环境,受国内外的广泛关注。浓香型白酒是中国白酒三大香型之一,窖泥是浓香型白酒特征性风味物质-己酸乙酯代谢必不可少的环境。本方法针对窖泥特殊的厌氧环境,采用厌氧袋完成窖泥样品的采集,并进行窖泥宏基因组的提取及保存。本方法对研究白酒酿造微生物多样性及功能有重要价值。
关键词: 中国白酒, 窖泥, 样品采集, 宏基因组提取
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
一、窖泥样品采集
以浓香型白酒窖池为例,分别采集窖壁、窖底三个不同空间位置的窖泥。为消除窖池不同位置窖泥的异质性,每个位置取不同位置的三个样品为对照,取样点示意图如图1。为了尽量保证窖泥厌氧状态,窖泥打孔采集后尽快放入装有厌氧产气袋的自封袋中。每个点取20 g样品。
图1. 窖池窖泥样品采集示意图 1~3为窖壁上部窖泥,4~6为窖壁中部窖泥,7~9窖池底部窖泥。 二、窖泥DNA的提取
溶液配方
致谢
感谢江南大学酿造微生物与应用酶学研究室的各位老师、同学对本实验方法的帮助和改进。本方法改编自博士论文 (王雪山,2018) ,已在多篇论文中应用 (Wang et al., 2017; Wang et al., 2018) 。
参考文献
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