适用说明:本产品说明书适用于KAPA RNA HyperPrep试剂盒加RiboErase (HMR)(KK8560, KK8561, KK8542, KK8544, KK8546, KK8001, KK8481, KK8482)。 友情提示:本文档包含原说明书中的产品描述,产品应用及实验操作流程等主要信息,欲了解关于本产品详细说明及信息,建议参考原说明书 (点击面板上“下载PDF”可下载)。
产品描述
用于Illumina测序的含有RiboErase (HMR) 的KAPA RNA HyperPrep试剂盒,包含去除核糖体RNA (rRNA) 和通过总量为25 ng-1 μg的经过纯化的RNA进行链式RNA-Seq文库快速构建所需的所有缓冲液和酶,具体步骤如下:
该试剂盒提供了用于反应纯化的KAPA纯化磁珠,以及用于rRNA去除、cDNA合成、文库构建和扩增所需的所有酶和缓冲液,但不包括RNA或接头。KAPA接头另售。 反应缓冲液以方便的形式提供,包含所有需要的反应组分。这最大限度地降低了RNA酶污染的风险,确保了反应组分的一致性和均质性,并改善了重复样本之间的均一性。类似地,文库构建过程的每一个步骤都配有单独的酶混合物,从而减少了移液步骤的次数。 为了使序列覆盖均一性最大化,并维持相对的转录本丰度,尽量减少文库扩增偏差是至关重要的。KAPA HiFi DNA聚合酶是为低偏差高保真PCR而设计,是NGS文库扩增的首选聚合酶1, 2, 3, 4。含有RiboErase (HMR) 的KAPA RNA HyperPrep试剂盒包含用于文库扩增的KAPA HiFi热启动高保真酶预混液 (2X) 和文库扩增引物混合物 (10X)。
产品应用
含有RiboErase (HMR) 的KAPA RNA HyperPrep试剂盒是设计用于手动操作和自动化地通过总量为25 ng-1 μg的RNA进行NGS文库构建。该试剂盒可用于去除细胞质(5 S、5.8 S、18 S和28 S) rRNA和线粒体 (12 S和16 S) rRNA。该实验方法适用于多种类型的RNA测序应用,包括:
• 高质量和低质量RNA样本 (例如,从FFPE组织提取的样本) 的基因表达分析; • 单核苷酸多态性 (SNV) 发现; • 剪切点和基因融合突变识别;以及 • 多腺苷酸化和非多腺苷酸化的特征RNAs,包括非编码和未成熟RNAs。
该试剂盒与长度 < 100 bp的小RNA不兼容。
工作流程图
实验操作流程
使用过本产品的部分文献
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