摘要:B 细胞主要通过呈递抗原和产生抗体在自身免疫病的发生、发展中发挥重要作用,研究抗原特异性的B细胞免疫反应非常重要,但是对于特异性B细胞免疫反应的检测非常困难,于是我们根据B细胞上的BCR可以识别Qb抗原的特性,利用Qb-AF647富集到抗原特异性B细胞。由于流式细胞仪是使细胞以单个方式依次通过探测光束,并采集细胞被光照时产生的各种信号,并能对多个荧光参数进行关联分析的一种仪器,所以我们对富集后的抗原特异性B细胞通过流式细胞仪进行检测。
关键词: B细胞, 流式细胞染色, 流式细胞仪
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
一、 收集细胞
结果与分析
实验结果见图1。
图1. 小鼠和Qb-VLP免疫的脾脏细胞富集及检测结果. A. 用Qb-AF647分别标记来自naïve 小鼠和Qb-VLP免疫12天的脾脏细胞,并用磁珠富集。B. 从Qb-VLP免疫14天小鼠的脾脏细胞富集Qb-AF647+ 细胞,进一步将其分为GC B细胞和PCs (Liao等,2017)
失败经验
溶液配方
致谢
侯百东实验室的工作得到中国科学院,国家自然科学基金和国家科技重大专项的支持。本文实验方案改编自本实验室的发表文章Liao等(2017) 和Hua和Hou (2013)。
参考文献
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