摘要:B细胞在抗原活化后除了分化成抗体分泌细胞 (浆细胞) 外,还可以分化成生发中心细胞、记忆细胞等具有不同生理功能的细胞类型。以往对于B细胞分化调控的研究由于体外培养困难受到很大限制。我们利用实验室建立的抗原特异性B细胞标记和富集技术,可以在动物体内获得抗原特异性B细胞,这将有力地推动对B细胞分化机制和调控规律的研究。由于流式细胞仪是使细胞以单个方式依次通过探测光束,并采集细胞被光照时产生的各种信号,并能对多个荧光参数进行关联分析的一种仪器,所以我们对富集后的抗原特异性B细胞分化相关转录因子通过流式细胞仪进行检测。
关键词: B细胞, 流式细胞染色, 流式细胞仪
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
一、 收集细胞
表3. 流式染色配置方案
结果与分析
实验结果见图1。 图1. Qb免疫野生型小鼠1个月流式检测结果. 其中A为Qb+ B细胞中IRF4+ 表达情况;B为Qb+ 记忆B细胞中T-bet表达情况 (Liao等, 2017)。
失败经验
溶液配方
致谢
侯百东实验室的工作得到中国科学院,国家自然科学基金和国家科技重大专项的支持。本文实验方案改编自本实验室的发表文章Liao等 (2017) 以及 Hua和Hou (2013)。
参考文献
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