摘要:本实验流程叙述如何由雌性果蝇腹腔取出完整的卵巢,并进一步解剖出其卵管(ovarioles),再经由体外培养 (ex vivo) 的方式使卵室 (egg chambers) 维持基本功能,并透过光学显微镜进行即时影像分析。此流程着重于分析第九至十期的卵室发育,此阶段的卵室,前端的卵泡细胞 (follicle cells) 会有4~8颗细胞组成一群组 (cluster),且开始往卵母细胞 (oocyte) 的边境 (border) 方向迁移,因此我们亦称这群会移动的细胞为边境细胞 (border cells)。此流程能维持卵室在体外培养时间长达8小时,以即时观察边境细胞迁移的状态。亦可观察不同基因型卵室的即时发育过程,并通过生物感应器 (biosensors) 同步观察讯号传递分子的变化,此流程建立亦有助于测试药物对正常或癌化细胞迁移的影响。
关键词: 即时影像, 边境细胞, 体外培养, 卵巢发育
材料与试剂
仪器设备
软件
实验步骤
一、准备雌果蝇以解剖卵巢样本
二、解剖雌果蝇卵巢以游离其卵管 (ovariole) 或卵室
三、置放卵室于培养皿
四、显微即时影像撷取设定
溶液配方
致谢
参考文献
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