实验原理:在特定的解离液中切碎材料后使细胞破碎,分散细胞器,进而解离出细胞核,同时解离液还可防止细胞核间相互粘连。PI染细胞核后,在一定压力下逐个通过喷嘴,进入流式照射室,细胞核所带的荧光素被激发,发射出荧光,根据荧光的发射波长,选择相应的荧光通道进行检测。最后,光信号再转化成电信号,经数据处理输入电脑,呈现出点图和峰图两种流式图谱,峰图纵坐标为粒子数,横坐标为荧光强度。由于细胞核G1期的DNA含量反映这个细胞的倍性,因此,运用流式细胞仪测定的植物核DNA含量可以间接获取细胞的倍性。生物体的单倍体基因组所含DNA总量称为C值。 实验目的:通过流式细胞仪检测特定组织中细胞核的倍性。
关键词: DNA含量, 荧光素, 细胞核倍性, C值
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
注意事项
解离液和材料的用量可根据材料中核的多少而适量增减,例如愈伤中核多可适量少用些材料,而根中核较少所以可适量少加些解离液,尽量保证解离液中较高的核浓度。选择合适的解离液,不合适的解离液可能导致很高的碎片峰。取材要新鲜。
溶液配方
注:所有试剂均用进口。
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