Production of Diploid Strawberry Seedlings by Tissue Culture and Subculture

材料与试剂

1. 2 ml离心管
2. 乙醇
3. NaClO
4. MS (Phytotechnology Laboratories, catalog number: M519)
5. Glucose 
6. Agar 
7. IBA sigma
8. NaOH (1 M)
9. Sucrose
10. 点种子培养基 (1 L) (见溶液配方)
11. 继代培养基 (1 L) (见溶液配方)
    

仪器设备

1. 剪刀
2. 移液器
   

实验步骤

1. 将草莓种子置于2 ml离心管内，用70%的乙醇清洗30 sec，吸出液体时注意不要吸掉种子。
2. 10% NaClO 清洗8 min。
3. 无菌水洗5次。
4. 将种子均匀点在培养基上，避光7天左右移至光下培养，培养条件为相对湿度60%，光周期为16 h/8 h (日/夜)，光密度为450 µmol m^-2 s^-1。
5. 草莓的继代培养
   将生长周期60天左右的无菌草莓组培苗的根及叶片叶柄剪去，将茎段插入继代培养基，每瓶约5个外植体。培养条件为相对湿度60%，光周期为16 h/8 h (日/夜)，光密度为450 µmol m^-2 s^-1。
   

溶液配方

1. 点种子培养基 (1 L)
   

   MS	2.2 g
   Glucose	10 g
   Agar	7 g
   IBA	0.01 mg/L

   用1 M NaOH调pH至5.8
2. 继代培养基 (1 L)
   

   MS	4.4 g
   Sucrose	30 g
   Agar	7 g

   用1 M NaOH调pH至5.8