材料与试剂
- 2.7 L乐扣乐扣保鲜盒
- 青霉素瓶塞子
- 锡箔取气袋
- 1 ml气密针
- 柑橘果实
- 标准二氧化碳气体
- 标准氧气
仪器设备
- 量筒
- 天平
- Agilent 7890A气相色谱仪
- 安捷伦气相色谱系统化学工作站
- 热导池检测器
实验步骤
- 果实内部CO2和O2的测定
将柑橘果实浸于水下,用气密针从果蒂插入果实中柱鞘部位抽取0.5 ml果实内部气体,然后注入Agilent 7890A气相色谱仪中进行检测。重复3次。
- 呼吸强度测定
将称取质量后的5个果实放于密封的乐扣乐扣密封盒中,静置2 h后用气密针抽取1 ml气体于Agilent 7890A气相色谱仪中测定果实释放的CO2含量,测定完后对装有果实的容器用排水法量取容器体积。
根据公式:呼吸强度(ml·kg-1·h-1)=(CO2浓度-空白样CO2浓度)*容器体积/果实质量*密封时间,重复3次。
- 标准曲线的绘制
根据果实中CO2和O2的含量,将含有CO2 (9.98%) 和O2 (5.1%) 的标准气体冲入锡箔取气袋,该标准气体用氮气平衡。用1 ml气密针分别从锡箔取气袋抽取0.2 ml,0.4 ml,0.6 ml,0.8 ml,1 ml标准混合气体于Agilent 7890A气相色谱仪中测定,根据5个浓度梯度的色谱图,用气相色谱工作站,建立标准曲线并得出相关系数等指标。
- 实验结束后,调出提前编好的关机方法,降温各热源 (Oven temp,Inlet temp,Det temp),关闭TCD气体 (N2,H2,Air);将此方法下传至7890A。待各处温度降下来后 (低于50°C),退出化学工作站,退出Windows 所有的应用程序;关闭PC;关7890A电源,最后关载气。实验完毕后进行登记,并整理各种实验用品。
注意事项
为了充分发挥TCD的性能和避免出现异常,在使用中应注意以下几个方面:
- 确保毛细管柱插入池深度合适;
- 避免热丝温度过高而烧断;
- 避免样品或固定液带来的异常;
- 确保载气净化系统正常;
- 注意程序升温时调整基线漂移最小;
- 进样口的隔垫要经常更换。