材料和试剂

直径为0.2厘米的经确认的真空输送管（Patterson Veterinary，目录号：07-8914311）
直径1厘米的Tygon 管（Fisher Scientific，目录号：14-171-104）
麻醉装置的清除剂过滤器（Patterson Scientific WAG装置，目录号：78909457）
由橡皮筋和手术用丝绸制成的稳定/张力扎带（shopmedvet.com，5-0丝绸； 100M暗盒SKU：SLK50）
绣花线（DMC，目录号：117S-3380）
活页夹，ACCO 2英寸（订书钉，目录号：72100）
棉花- 涂药（Shopmedvet.Com，6”，非无菌，SKU：CTA6）
手套
BALBc 或C57Bl / 6小鼠（20至25 g； 8-10周；印第安纳州印第安纳波利斯的Harlan Laboratories）
70％乙醇（本地来源）
蔗糖

配套设备

4-0铬肠线（切成3毫米长）（Ethicon ，目录号：635H ）。
镊子（Duemont No.5 ，精细科学工具，目录号：11251-10；Graefe 角锯齿，精细科学工具，目录号：11049-10）
11号手术刀刀片（羽毛/电子显微镜＃11，目录号：72044-11，VWR，目录号：102097-822 ）
手术刀＃3（Walter Stern 320-051 ）（VWR，目录号：25607-947）
珠子灭菌器（Germinator 500玻璃珠灭菌器，Cell Point Scientific 5-1450 ）（VWR，目录号：101326-488）
垫加热/恢复站小鼠（HTP-1500 ADROIT兽医热泵和软温度兽医隔热垫V016 ）（帕特森兽医供应，猫考勤号码小号：78910655和78910866）
手术设置（下面的“ see 程序”部分）
解剖范围（可折叠悬架上的Optika SZN-10 三目立体变焦显微镜，纽约显微镜公司，目录号：OPSZN-10）
异氟烷麻醉机[ Tec的3 EX异氟醚标准填充汽化器的Versa II麻醉系统，随着Mapleson -D非再呼吸（NRB）系统] （帕特森兽医供应，猫考勤号码小号：78703592，78910545随着78909636）
底板，S＆T滚珠链缩回（精细科学工具，目录号：18100-00）
光纤灯（Dolan-Jenner光纤照明系统181-1 ）（VWR ，目录号：41446-062）
冯· 弗雷丝（Semmes-Weinstein，20条单丝，BioSeb ，bioseb.com）
高压釜

软体类

XT8 Ethovision Videotracking 系统软件（Noldus 信息技术，利斯堡，弗吉尼亚州，美国）对于分析中运动中的情感行为测试
图P 一d 棱镜8 对于统计分析和数据展示（的GraphPad 软件公司，拉拉霍亚，CA）

程序

该手术是演出在一个酒精清洗的平表面下方一个夹层范围有了一个设备安装有了稳定约束要举行的嘴打开。建议是要使用的小号安藤牛逼球链回缩系统基地板块。两个长度中5-0 手术丝（或绣花线，软字符串，为了避免伤害到的老鼠的舌头）用橡胶带打结在该串完能要带钩到该板块的其他罗纹边。该手术丝绸是拉紧对面的老鼠的嘴巴对于约束中的口在一个开放位置对于麻醉和手术（图2）。将在加热垫恢复站上一个表毗邻要在手术安装因此这小鼠可以被迅速转移到该站一旦完成中术。该站是否应要设定为41 度摄氏度。我们广场的空房屋凯奇在顶部中的加热垫关于一个小时之前到该外科手术要允许的凯奇为了热火最多要一个舒适的温度; 半在该垫，半关闭。

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图2.鼠标麻醉设置

由于这是一种口腔外科，一个设置是所需也就是说威尔可靠地交付异氟醚到该鼠标虽然仍留下的口免费为的操作。建议是要使用一个双- 管系统：一个0.2 厘米直径管要交付的麻醉，下跌内部甲更大的1 厘米直径的Tygon 管。该外管威尔连接到该清道夫过滤器中的麻醉单位（图2）。图3 提供了进一步澄清中的取向要迁就的老鼠的鼻子。有应成为一个8 毫米间隙之间的提示中的内管与该提示中的外管，该鼠标鼻子可以是下跌进入的外管要允许麻醉交货，虽然仍然允许的嘴巴要被打开而且操控下在外科杂志红霉素。该程序是完成在一个夹层范围在一个放大中10X，虽然较高的放大倍数可能会成为受益当首先学习的过程。

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图3. 鼠标约束

消毒手术工具（手术刀手柄，部队诗）在一个珠灭菌，高压灭菌器，或者喷涂他们用70 Pasento 乙醇和空气干燥。
设置最多的麻醉马茅根有了一个分路器要提供双管法中的混合氧气/异氟烷为了双方的感应商会与该手术安装程序。最佳设置将依靠在该异氟醚交货蒸发器储罐，但当前推荐通货膨胀是一个氧气级别中1.5 和一个异氟醚级别中3 Pasento。
放置在鼠标进入该感应商会对于初始麻醉诱导; 在典型的快速呼吸会开始要慢下来要更深层次的呼吸，移动从的上胸围为的下胸部。这将取关于一个要两分钟，根据在该鼠标与该箱体尺寸。
开关麻醉流程要在手术区管。
移动的麻醉鼠标快速为了将手术区域下方的解剖范围配售它的鼻子进入该的Tygon 管要保持麻醉深度而为了避免有要更换的鼠标返回进入该感应商会要重复的麻醉过程。是否应任何运动发生时，地方的鼠标返回进入该感应商会和重复此过程。运动中的任何一种通过将鼠标指示的油管是不是提供了足够的异氟醚流。
抑制的老鼠对于手术。胡克一个约束下的上两个前齿，而在其他约束下方的下两个前牙（图4），轻轻拉的嘴作为广开作为可能虽然仍保持在老鼠的鼻子里面的麻醉管。如果必要，使用磁带跨越的尾要帮助保持该鼠标稳定。

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图4.开口定位的俯视图

调整的显微镜和照明作为所需在订单要有无一个清晰的视觉进入的鼠标口（图5）。从这里，开始的过程。

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图5. 广泛的观中的手术和约束设置，向上

用一个手术刀刀片（＃11）安装在一个外科手术刀手柄（＃3），做一个小切口进入的老鼠的唇内Bucchal 保证金抗皱一个小下面的屋顶中的嘴（图6）。

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图6. 突出显示的外科网站提供插图中的2 毫米切口（15 X ）。该图揭示的标的三叉神经分支。

轻轻地切离开的软组织使用的提示中的手术刀刀片。您将最终创建一个洞要显示的三叉上颌眶下神经分支那支配的牙齿和Whiskerpad 即将一起向后在该骨卵圆圆孔要输入的头骨（图7）。最初打开该网站一小更宽在一个尸体或者实践鼠标将允许可视化中的眶下神经支配而该卵圆圆孔哪里的艳色肠将要插入的（图8 和9）。该手术网站按说应该要相当小; 没有更比一夫妇中毫米，且没有缝合伤口应不需要。如果一个有经验的实验者做了手术。请注意这牛逼他解剖与手术有无去过夸张的在全部中的描述形象提供。这是不可能的，但有会是过度出血从的伤口如果该切割是更深比预期的，然后停止该程序和待办事项不使用的鼠标对于进一步的实验。

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7.示范图神经束入世孔处。该ç UT被夸大更好的显示在这个更高的权力观（15 X ）。

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图8.孔内夸张解剖（15 x ）中铬肠缝合线位置的演示。

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图9.将铬色肠线与ION神经并排在圆孔中（15x ）

用小镊子（推荐：杜蒙＃5），握3 毫米缝合线通过的结束和角度它进入该洞你有无就切在该折痕中的老鼠的脸颊（图8），然后滑动的缝合进的孔，除了该。ION 的缝线是否应转到在有了非常小阻力; 如果你感觉电阻，它的手段那你待办事项不是有无的正确角度而被不指导的缝合进入的孔。该神经是否应决不是感动与该金属手术器械。
按该缝合进的卵圆作为远东作为可能与该镊子（图小号8 和9）。然后，轻轻地让围棋，而且使用的封闭技巧中你的镊子要推的结束中的缝合而且通过该孔处。你是否应就勉强要能要见的终结中的缝合如果您有无推它在正确。
该切口用于在该模型是小够了那无缝合线是必需的要关闭的伤口。在这两个沙姆斯与该FRICT-ION 模型的伤口开始要关闭在该一二十四小时（图10）。

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图10. 深水手术在0，24，而48 ^ h 后手术。伤口是晴关闭在24 ^ h 而且是完全关闭到48 H. 只有轻微的血管分布可以被看到在24 H.

放置在鼠标进入该热回收站直到它醒来从该麻醉而被移动之前返回到该家笼。老鼠应该是经过一个小时后，手术要确保所有普通汽车功能有返回。（这是一个预防措施，作为典型的小鼠是全功能在纪要中去除从麻醉。）小鼠应该然后是经过报对于该周刊继手术，其中包括评估重量和表面秋波进入的嘴要确保不加重中的伤口或者感染已经发生了。这是可能的那小鼠威尔没有增益体重的日之后的手术，但通过一天两个应该要返回到的典型的渐进重量增益。
还有应该要没有可察觉变化在行为; FRICT-ION 小鼠应该出现类似的要朴素小鼠要的裸体，眼睛如果有是一个变化中的行为，这种由于体重下降，昏睡，等。，待办事项不使用的鼠标对于进一步的实验。如果该权重瀑布下面八十百分比中的老鼠的体重在此之前要手术，该鼠标是否应是经过由兽医人员和，如果适用，人道安乐死。

资料分析

伤害性和甲Nxiety ř 兴高采烈乙Ehavioral Ť Esting 而d 阿塔甲Nalysis

动物是否感动从该房屋间和驯化在该试验室为30 敏在他们的家笼之前要测试。动物是驯化要温和约束（持有在戴手套的手对于晶须垫测试）要评估灵敏度为机械刺激应用到的Whiskerpad ，即，反身退。经过10个培训会议要适应的啮齿动物要被举行在一个戴手套的手，灵敏度中的人脸为机械是量化到的号码中提款活动从渐变薄尼龙冯· 弗雷长丝随着定义的弯曲力（拉伸强度），刺激用的最低纤维（0.008 G，1.65）是不检测的在该后退中的人的手; 在最大的光纤（6.0 G，4.74）提供的感觉中一个钝纸剪贴线结束。动物是免费为自愿移动他们的头离开从的刺激。一个单审判下设中5个应用中冯· 弗雷长丝开始中档（0.4 G，3.61）应用一旦每3 到4 S. 如果一个积极的响应时，将下一个较弱的灯丝是应用相反，持续直到有是没有响应; 如果没有积极的响应是诱发，在接下来更强的灯丝是应用而继续直到有是一个响应（Chaplan 的Et 铝。，1994）。该平均发生中提款活动在每个的该试验是表达作为该号码的反应出的5，0 表示没有退学，而5 指示的最大数的取款。反应要减少革兰氏力相比要控制注明提高灵敏度。经过诱导的三叉神经损伤模型，统计学显着机械过敏开发出可靠地在一个周和持续无限期作为测试用校准冯· 弗雷长丝在该ION的晶须垫感受现场（图11）。该机械刺激阈值在双方的同侧和对侧胡须垫是显着减少在小鼠后的手术相比，为了手术深水和控制小鼠。这减少持续直到安乐死，十周后 -手术。

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图11. 雄性小鼠进行测试对于机械异常性疼痛在该晶须垫使用冯弗雷长丝。双向ANOVA （Dunnett氏多重比较试验）当时执行的在这些数据：Ñ = 5 每组，* 表示甲P -数值中< 0.05 [ 外科侧：F（20，198）= 9.178，对侧侧：F（22，144）= 32.20 ] 。在事后分析，邦费罗尼调整要所有P -值对于周逐周比较中FRICT-ION 与控制息率全部九P -值< 0.0009。

虽然管理中神经病理性疼痛是重要因为在许多案例这是严重的和无情的，研究为开发更好的治疗中的焦虑和抑郁共病是也中总理重要性在总体质量中人寿（冰臼的Et 铝。，2007）。另一个主要优势的该FRICT-ION 模式是在能力要检查这些行为在慢性时间。点可测试在该模型是焦虑- 再迟来的措施这样的作为零迷宫，光暗偏好，并打开实地探索行为。在图12，从直男鼠被放置进一个浅/深商会和监控对于十几分钟。在这个测试，一个商会当时点燃有了一个明亮的灯泡虽然在其他当时不停地暗，而小鼠被允许自由访问要要么厅。小鼠随着FRICT-ION 手术是显著不太可能的要花费时间在该灯室，并探讨该商会少在通用，这是指示中焦虑。

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图12. 在模型诱导后第8周测试显示的焦虑行为（每组n = 5，*表示P 值< 0.05，使用t 检验进行比较）。

这两种认知与该蔗糖飞溅抑郁症测试（网络古尔13）钙ñ 是可利用的要分辩这些较高阶的后果中慢性疼痛中的FRICT-ION 型号（亚尔钦的Et 铝。，2011; Kniffin 的Et 。铝，2015年）。小鼠进行鉴于该蔗糖飞溅测试，在这30 Pasento 蔗糖水是喷涂走上老鼠的臀部，而小鼠进行监控对于五分钟要确定的号码中时报它们整齐的臀部和笼区湿润。小鼠随着FRICT-ION 手术疏导明显少常，这是指示中抑郁行为。

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图13. 抑郁行为进行了测试。在周8 发布模型感应在从直雄性小鼠（N = 5 每组，* 表示甲P -数值中< 0.05，比较运行使用甲Ť -Test ）。

注意事项

对于该假手术，将小切是制造在该Bucchal 保证金而没有缝合线插入。如果完成正确，这个过程应该不诱导任何出血里面的老鼠的嘴巴还是脑腔。取出的老鼠从它的约束而将在一纸毛巾在一个干净笼子随着床上用品也已去过坐在一个暖气垫。该鼠标是否应成为自觉少比一分钟后，你有没有删除它从麻醉，而且应该要向上和散步通常在五分钟的鼠标是否应恢复从该手术有了缓和，而且要返回到正常行为通过将结束中的一天。
随着实践，这个过程是否应以没有更多比一个少数分钟。这是重要的要执行此过程快速为了避免在侧面影响中长期暴露到麻醉。
这个过程是否应被完成用无出血; 但是，如果出血时，只需应用压力到该网站有了一个棉拭子之前的出血消退。
老鼠能成为一栋在一起，而是否应不要求任何护理后手术除对标准监测。

致谢

该作者希望要承认的实验室管理技巧中凯瑟琳· 戈特，部门基金和美国国立卫生研究院资助R21 DE028096 支持的麻醉科疼痛实验室的微创微创口内FRICT-ION 方法描述这里当时首先使用在一个最近的出版物，但我们简称为这有作为的“TIC” 法（张的Et 铝。，2019）。该FRICT-ION 协议当时改编或修改从我们以前三叉炎症压缩（TIC）方法在哪里艳色肠道缝合当时不结盟伴随的眶下神经在小鼠使用的更多微创手术方法背后的眼睛（马的Et 铝。，2012 和2015年，里昂的Et 。铝，2015年和2018）。该作者确认的洞察提供通过前研究科学家，博士妃马，谁介绍的概念中诱导眶下神经压缩通过缝合线插入进一个卵圆而是比搭售的神经要制作一个鼠标的临床前模型中慢性三叉神经性疼痛。

竞争利益

KNW 是一个ñ Unpai d 顾问为美国Elixiria 生物技术公司和一个研究生理学家在该阿尔伯克基VA 医疗保健系统。这种通信确实不必然反映的意见中的部门中退伍军人事务部或者在美国政府。

道德规范

所有的研究都设计要尽量减少动物使用而演出在按照与机构批准并在按照与该国家机构中健康指南针对的护理和使用中实验动物（NIH 出版号80-23）经修订的1996年。

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