材料和试剂

鼠标
注意：
1. 为了达到统计学意义，需要至少10只小鼠。 15只小鼠是理想的使个体变异最小化。
2. C57BL/6，雄性，2个月至一岁（2-4个月龄是最佳的），3-5只小鼠在断奶后保持在一个笼子中。
清洁溶液
注意：使用70％乙醇，然后用无菌水（以去除乙醇的气味）清洁室和/或对象。空气干燥3分钟。

设备

装置
注意：有机玻璃盒的尺寸为40厘米x 40厘米x 40厘米。有机玻璃的颜色是白色或透明的。如果老鼠没有经历旷场试验，磨砂的白色有机玻璃盒子可以减少外部视图的影响。

图1.用于新对象识别的设备
对象
注意：物体的大小约为4厘米x 4厘米x 4厘米。对象的形状很像建筑块。由木头，金属或硬塑料制成的物体是优选的，因为这些物体耐受咬住拆除。因为小鼠是protanope（红色盲），对象的颜色应该通过分析Vischeck软件（一个免费的软件可从网站：http：//www.vischeck.com）检查，以确保小鼠能够区分他们。
相机/电脑
注意：原始数据存储在记录设备中以供进一步分析。诸如"智能系统"（Panlab）的视频跟踪系统可以帮助您容易地获得小鼠到对象（小鼠的头越过图1中所示的对象边界线）的探索时间。勘探时间也可以手动计算。使用Prism（Graph Pad软件）进一步分析结果。

程序

注意：

新颖的对象识别测试是非强制识别记忆测试。小鼠的任何压力或线索可以增加结果的变异性。最小化来自环境和物体的刺激并使小鼠适应环境是非常重要的。
在测试之前，将一个乒乓球放入家笼中一周以减少小鼠由新物体诱导的应激。
如果小鼠没有经受任何测试，将它们在空笼子中每天转移5分钟至少3天以减少在未来任务中的应激反应。
有机玻璃盒和物体在使用前通过清洁溶液清洁并空气干燥3分钟。
鼠标的整个探索过程使用相机记录并存储在计算机中。
1. 第1-2天：习惯
  1. 小鼠首先被运送到预备区域，这是靠近手术空间10分钟的地方。
  2. 然后将小鼠放入装置中进行分析10分钟适应环境以减少压力。
  3. 该程序进行两天。
2. 第3天：训练日
  1. 类似于第1天和第2天，首先将小鼠运送到准备区域，其是靠近手术空间10分钟的地方。
  2. 两个相同的对象被放置在有机玻璃盒中，如图1所示，小鼠探索10分钟。
3. 第4天：测试日
  所有过程与第3天相同，只是一个旧对象随机替换为一个新的不同对象（视频1）。
  
  视频1.新对象
4. 分析
  1. 探索时间由小鼠停留在图1所示的圆圈区域的时间计数。
  2. 如果探测时间的总和小于20秒，小鼠可能处于压力下。应排除数据。
  3. 如果探索时间总计超过5分钟，则记录胶片需要由人检查。例如，鼠标可能站在对象或新郎在圆形区域。结果也应排除。
  4. 优先率是通过总数除以探索时间由探索对象的时间。计算公式对象首选项是：首选项％=探索的时间单个对象/对对象的总探索时间x 100％。
  5. 在图2中示出了新的对象识别的示例。在第3天，两个相同对象的探索时间是相似的（周围 50％）。在第4天，动物对新物体显示更高的偏好。的对新颖物体的偏好的平均值高于50％（〜60％常见）。使用Prism的单因素方差分析用于统计分析。
    
    图2.野生型小鼠的第3天和第4天的对象偏好（* P <0.05）

致谢

该协议改编自先前的作品Moscardo等人（2012）和Huang等人（2014）。

参考文献

Huang，T.N.，Chuang，H.C.，Chou，W.H.，Chen，C.Y.，Wang，H.F.，Chou，S.J.and Hsueh，Y.P.（2014）。 Tbr1 haploinsufficiency impairs amygdalar 轴突投射和结果的认知异常。 Nat Neurosci 17（2）：240-247。
Moscardo，E.，Salvetti，B.，Becchi，S.，Bertini，G。和Fabene，P。（2012）。啮齿类动物中的新型物体识别测试：基本方法方面。测量行为：476.