研究背景

近年来微生物组的研究颠覆了人们对许多疾病的认知，已经证实肿瘤、消化、精神、代谢、心血管等多种疾病均与肠道菌群变化密切相关。无菌动物是指利用现有方法检测不到一切活的微生物和寄生虫的动物。从出生开始，无菌动物在其整个生命周期中均生活在与外界完全隔离的无菌环境中，其体内和体表不含有任何的微生物。其绝对无菌的微生物背景使其成为人体微生物组研究的理想模式动物和核心技术工具。无菌动物可以为疾病微生物组及靶标的预防、诊断、治疗和转化医学研究提供重要的支撑条件。将菌株或菌群移植到无菌动物体内可以研究、筛选、评价、鉴定微生物功能，是应用无菌动物研究微生物功能及作用机制的重要手段和实验方法。

实验原理

微生物样品经过处理后，通过灌胃的方法，将微生物由小鼠口腔直接注入到小鼠胃中，使其在小鼠肠道定植，从而实现无菌小鼠肠道微生物移植，研究微生物在无菌小鼠的功能和作用机制等。

材料与试剂

1.  15 ml离心管 (Thermo Scientific Nunc，catalog number: 339650)
2.  1.5 ml离心管 (Thermo Scientific Nunc，catalog number: 32195455321)
3.  2 ml冻存管 (CORNING, catalog number: 430488)
4.  哥伦比亚CNA血琼脂平板 (9 cm) (青岛海博生物，catalog number: HBPM0153)
5.  纱布
6.  封口膜 (PARAFILM，catalog number: P7793-1EA)
7.  1 ml无菌注射器 (上海康德莱企业发展集团股份有限公司，catalog number: 60017031)
8.  粪便采集器 (上海鼎杰生物科技有限公司，catalog number: DYC-524)
9.  磷酸盐缓冲盐 (碧云天生物技术公司，Beyotime，catalog number: C0221A)
10.  氯化钠溶液 (四川科伦药业股份有限公司，catalog number: B14200853444)
11.  无菌甘油 (Millipore Sigma, catalog number: G7893)
12.  液氮
13.  过氧乙酸 (山东瑞泰奇洗涤消毒技术有限公司，瑞泰奇过氧乙酸)
    

仪器设备

1. 8和10号小鼠灌胃针
2.  辐照灭菌托盘天平
3.  网滤筛 (绿若筛网制品厂，catalog number: 0565)
4.  -80 °C超低温冰箱 (赛默飞世尔科技 (苏州), Thermo Fisher Scientific, catalog number: 902GP-ULTS)
5.  涡旋仪 (Stuart Scientific, Stuart Scientific Shakers, catalog number: Z648531)
6. 离心机 (Microyn，Labnique, catalog number: MT-Spinplus-6)
7.  实验室匀浆机 (YL/友联仪器， catalog number: FSH-2A)
8.  洁净工作台 (苏净安泰空气技术有限公司，AIRTECH，catalog number: BCM-1000A)
9.  高温高压灭菌器 (山东新华医疗器械股份有限公司，实验动物专用型灭菌器，catalog number: BIST-A-D910-D-B)
10. 恒温水浴箱 (天津泰斯特仪器有限公司，catalog number: DK-98-II)
11.  紫外分光光度计 (Thermo Fisher，catalog number: GENESYS180)
12.  微生物培养箱 (Thermo Fisher，catalog number: IMH180)
    

实验步骤