Vasoligation in Mongolian Gerbils

材料与试剂

1. 35 mm无菌塑料培养皿（Corning，catalog number: 430165）
2. 医用缝合线（上海浦东金环医疗用品股份有限公司）
3. 麻醉剂Avertin（sigma）
   

仪器设备

1. CO₂培养箱(Thermo, Herocell 180)
2. 手术器械(手术剪，解剖剪，眼科镊，显微镊，显微剪)
3. 体视显微镜(Motic SN-168)
   

实验步骤

1. 麻醉将长爪沙鼠称重，腹腔注射麻醉剂Avertin (sigma, 0.12-0.15 mL/10 g), 待雄鼠进入深度麻醉状态之后再进行以下操作。
2. 沙鼠的保定和被毛 将长爪沙鼠腹面向上放在手术台上，剪去腹部被毛；用75%酒精擦拭长爪沙鼠腹部，消毒。
3. 在雄性长爪沙鼠下肢上端水平线正中用剪刀横向剪开1.5 cm，用组织镊夹住肌肉层， 配合眼科镊撕开相同大小的开口。
4. 用眼科镊向下方夹住一侧的脂肪垫将睾丸、附睾和输精管拉出切口。
5. 找到输精管，钝性分离输精管约1 cm。
6. 左手拿眼科镊将分离后的输精管轻轻夹起，右手拿弯镊，在酒精灯上将弯镊前端烧红之后，将夹住输精管的眼科镊两侧烧断输精管。
7. 用眼科镊轻夹脂肪垫，将睾丸放回腹腔。
8. 同上处理另一侧输精管。
9. 缝合腹腔内部肌肉层和外部皮肤，单笼饲养。每天观察术后情况，连续3天。
   

致谢

感谢国家自然科学基金项目（Nos. 31572341, 31572347, 31772545, 31572348）、国家科技支撑计划项目（No. 2015BAI09B00）和“十三五”时期北京市属高校高水平教师队伍建设支持计划(IDHT20170516)的资助。

参考文献

1. 王妍. (2019). 利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除长爪沙鼠动物模型. 首都医科大学硕士学位论文.
2. Wang, Y., Zhao, P., Song, Z., Du, X., Huo, X., Lu, J., Liu, X., Lv, J., Li, C., Guo, M. and Chen, Z. (2020). Generation of gene-knockout Mongolian gerbils via CRISPR/Cas9 system. Front Bioeng Biotechnol 8: 780.