Histone Methyltransferase Assay in vitro
组蛋白甲基转移酶活性体外检测试验
发布: 2012年12月20日第2卷第24期 DOI: 10.21769/BioProtoc.311 浏览次数: 14901
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Q&A
参见作者原研究论文
The authors used this protocol in:
Apr 2012
Abstract
Histone methylation is an important epigenetic modification that plays important roles in plant development and growth. Histone methytransferases are the enzymes to establish histone methylation and here we describe a simple and effective protocol for detecting methyltransferase activity and specificity in vitro.
Keywords: Plant (计划)
Histone H3 lysine 36 (组蛋白H3赖氨酸36)
Methyltransferase assay (甲基转移酶检测)
Materials and Reagents
- 14C labeled-methyl-adenosyl-L-methionine (SAMS) (Sigma-Aldrich)
- Purified recombinant histones (from E. coli)
- Histone H3 (Roche Diagnostics, catalog number: 1034758 )
- Core histones (Sigma-Aldrich, catalog number: H9250 )
- Mononuclosomes and Oligonucleosomes (see procedure)
- Coomassie brilliant blue R-250
- MiliQ water
- SDS-PAGE
- KCl
- MgCl2
- Sucrose
- ZnCl2
- β-mercaptoethanol
- MAB buffer (see Recipes)
Equipment
- Water bath
Procedure
文章信息
版权信息
© 2012 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
如何引用
Sui, P., Yu, Y. and Dong, A. (2012). Histone Methyltransferase Assay in vitro. Bio-protocol 2(24): e311. DOI: 10.21769/BioProtoc.311.
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分类
生物化学 > 蛋白质 > 活性
植物科学 > 植物生物化学 > 蛋白质 > 活性
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