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Protein-RNA ELISA Assay

蛋白质-RNA酶联免疫吸附试验

Vanesa Olivares Illana Vanesa Olivares Illana
RF Robin Farhaeus

发布: 2012年09月05日第2卷第17期 DOI: 10.21769/BioProtoc.257 浏览次数: 15447

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The authors used this protocol in:

Cover of Cancer Cell, featuring study using the protocol.

Jan 2012

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Abstract

Protein-RNA ELISA assay is an effective and quantitative method to study protein-RNA interactions in vitro. In this protocol we used recombinant 6x HIS tagged protein, but it works as well for non tagged proteins.

Keywords: RNA (RNA) search Protein (蛋白) search Interaction (相互作用) search RNA-ELISA (rna-elisa) search

Materials and Reagents

  1. 96-well Microplate Nunc maxisorp White (Thermo Fisher Scientific, Nunc, catalog number: 436110 )
  2. Recombinant 6x HIS tagged protein
  3. Streptavidin (New England Biolabs, catalog number: N7021S )
  4. NaHCO3
  5. Phosphate buffered saline (PBS) (Life Technologies, Gibco®, catalog number:  10010031 )
  6. Tween 20
  7. BSA
  8. Biotinylated RNA
  9. 1 M Tris (pH 7.5)
  10. NaCl
  11. Yeast tRNA (Life Technologies, Applied Biosystems®, catalog number:  AM7119 )
  12. 6x His mAb-HRP Conjugate (Clontech, catalog number: 631210 )
  13. ECL Peroxidase Substrate Solution A and B (Pierce Antibodies, catalog number:  32106 )
  14. Water used for all solution is RNAase free
  15. q-PCR tape (R&D systems, catalog number: DY992 )
  16. RiboLoc RNAase Inhibitor (Thermo Fisher Scientific, catalog number:  EO0381 )
  17. RNA 3' End Biotinylation Kit (Pierce Antibodies, catalog number: 20160 ) 
  18. Binding buffer (see Recipes)
  19. PBS-T (see Recipes)

Equipment

  1. Luminescence Plate reader (BMG LABTECH, FLUOstar OPTIMA)
  2. Thermocycler
  3. Centrifuges

Procedure

English
中文翻译

文章信息

版权信息

© 2012 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.

如何引用

Illana, V. O. and Farhaeus, R. (2012). Protein-RNA ELISA Assay. Bio-protocol 2(17): e257. DOI: 10.21769/BioProtoc.257.

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分类

生物化学 > 蛋白质 > 免疫检测 > 酶联免疫吸附试验（ELISA）

生物化学 > RNA > RNA-蛋白质相互作用

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