研究背景
白蚁是一种属于等翅目的社会性昆虫 (Inward et al., 2007),主要分布于热带和亚热带地区,是木质纤维素的主要降解者,有助于维持生态系统的碳循环 (Yamada et al., 2005; Engel et al., 2009)。白蚁肠道微生物在其食物木质纤维素的消化分解,营养吸收,生物固氮以及抵御病原菌侵染等方面发挥重要作用 (Brune et al., 2014)。虽然近年来高通量测序技术的发展为揭示白蚁肠道微生物菌群种类、多样性及丰度提供了快速而高效的方法 (Warnecke et al., 2007; Hongoh et al., 2011),但是传统微生物的分离培养和鉴定仍然是了解肠道微生物功能不可缺少的手段 (McDonald et al., 2012; Tsegaye et al., 2019)。本文主要介绍白蚁肠道微生物样品的收集与制备,按照相关方法制备的样品不仅为分离不同种类的肠道微生物提供资源,还可用于微生物多样性如PCR扩增子和宏基因组等分析。
材料与试剂
- 内部放置樟木块的樟木盒子 (20 cm × 20 cm × 15 cm)
- 有盖子的塑料盒 (15 L, 44 cm × 30 cm × 15 cm)
- 有盖子的塑料盒特大号 (160 L, 73.3 cm × 52 cm × 43 cm)
- 培养皿
- 移液器和枪头
- 1.5 ml 离心管
- 塑料研磨棒
- 记号笔
- 无菌水
- 75%酒精
- PBS缓冲液 (见溶液配方)
仪器设备
- 体视显微镜 (品牌Olympus, 型号:SZ51)
- 超净工作台 (品牌AIRTCH,型号:SW-CJ-2FD)
- 镊子
- 解剖刀
- 冰盒
实验步骤