研究背景

生物分子间的相互作用是生命活动的基石，分子间结合的特异性、强弱、快慢等都是生命科学研究的重要内容。随着检测通量和灵敏度的提高，生物物理技术已成为研究生物分子互作的重要组成部分。表面等离子体共振（Surface Plasmon Resonance，简称SPR）技术是其中最广泛使用的一种。表面等离子共振（SPR）是经典的光学物理现象，从发现并被运用到生物医药领域已有数十年时间。作为分子互作的金标准，表面等离子共振目前已先后被美国药典、日本药典及中国药典纳入。
表面等离子共振（SPR）技术是一种基于光学原理发展而来的新型分析技术。是指光在棱镜与金属膜表面上发生全反射现象时，形成消逝波进入到光疏介质中，而在介质（假设为贵重金属）中又存在一定的等离子波，在基于能量守恒的前提下两种波段相遇时可能会发生的共振现象。该技术可以检测抗原与抗体、DNA与蛋白、DNA与DNA之间的相互作用，其优势包括无需标记、无分子量限制以及能够检测低亲和力相互作用等，现已广泛应用于生命科学、医学诊断、食品安全及环境检测等领域。
科研人员发现了一个新的疾病治疗靶标蛋白A，为了研究该靶标可能的功能以及针对该靶标开展小分子药物研发，中国科学院分子细胞科学卓越创新中心化学生物学技术平台利用分子互作金标准-SPR技术,基于Biacore 8K仪器的高通量性能，针对美国食品药物监督管理局FDA批准药物库以及临床候选药物库，为该项研究开展了大规模筛选。帮助研究人员发现了可与靶标蛋白A直接结合的活性小分子，为后续深入研究该靶标蛋白功能以及相应创新药物研发提供了全新的思路。

材料与试剂

1. 100% DMSO溶解的高浓度化合物96孔板（Corning公司，货号：3879）
2. 适配Biacore 8K仪器的筛选所用384孔板（MICROPLATE, 384 WELL, PP, F-BOTTOM Greiner BIO-ONE公司，货号：781201）
3. 适配Biacore 8K仪器的384孔板封膜（Microplate Foil 384-well，GE Healthcare公司，货号：BR-1005-77）
4. 适配Bravo仪器的70 μL量程移液吸头（Fluotics公司，AGI-70 I ST）
   
5. CM7 芯片

仪器设备

1. Biacore^TM 8K SPR system系统（美国Cytiva公司）
2. 自动移液工作站Bravo仪器（美国Agilent公司）
3. Multidrop^TM Combi 小型自动分液仪（美国Thermo Scientific公司）
4. 蛋白质稳定性分析技术（Nano DSF）PR.48仪器（德国Nano Temper公司）
5. 离心机Centrifuge 5810R（德国Eppendorf公司）
6. 微孔板振荡器ORBITAL SHAKER MX100-4A（CHINCAN公司）
   

实验步骤