材料与试剂

1. S系列SA芯片（Cytiva，BR100531）
2. Tris、HCl、NaCl、NaOH、β-巯基乙醇、Tween 20（Sigma-Aldrich公司）
3. 酵母Hnt3全长蛋白、Hnt3∆32 (残基33-232)截短体及多种突变体，储存在缓冲液（20 mM Tris-HCl pH8.0，100 mM NaCl，5 mM β-巯基乙醇）中。蛋白质的表达纯化方法参见文献1。Hnt3全长232个氨基酸，分子量为26.9 kD；Hnt3∆32 (残基33-232)截短体，分子量为23.6 kD；其余突变体C130A，H138A，S142A，T212A，F34A，K161A均为Hnt3∆32的氨基酸点突变。蛋白样品均为新鲜纯化浓缩，浓度为~200 μM。
4. DNA由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，合成两条单链核苷酸。
   其中一条链3′端在合成时加上生物素标记（5'-ATTCCGATAGTGAC-3'-biotin），另一条为其互补链，无生物素标记（5'-GTCACTATCGGAAT-3'）。双链DNA（dsDNA）分子量为8.9 kD。
5. 其他耗材：1.5 mL EP管, 1 mL, 200 µL, 10 µL枪头均为Axygen公司产品。
6. 0.22 μm微孔滤膜
   

仪器设备

1. Biacore T100（GE, Healthcare）
2. 超纯水仪（Millipore）
   

实验步骤