图文摘要




图1. 抗菌活性化合物高通量筛选流程 阳性指示：如阳性对照孔中类似，孔内微生物生长受到有效的抑制，液体澄清；阴性指示：如阴性对照孔中类似，孔内微生物生长迅速，无明显抑制。

材料与试剂

一、耗材

1. 100 μl枪头 (赛多利斯公司)
2. 200 μl枪头 (赛多利斯公司)
3. 1000 μl枪头 (赛多利斯公司)
4. 96孔板 (Thermo Scientific公司)

1. 大肠杆菌 (ATCC 25922)
2. 金黄色葡萄球菌 (ATCC 27217)
3. 溶藻性弧菌 (ATCC 33787)
4. 嗜水气单胞菌 (ATCC 35654)
5. 耐万古霉素肠球菌 (VRE)
6. 耐甲氧西林金葡菌 (MRSA)
7. 耐多药肺炎链球菌 (MDRSP)
   菌株由海军军医大学生物化学与分子生物学教研室传代保存。

1. 二甲基亚砜 (DMSO) (上海博光生物科技有限公司)
2. 氯霉素 (上海金穗生物科技有限公司) 
3. 氧氟沙星 (北京索莱宝科技有限公司)
4. 氟哌酸 (北京索莱宝科技有限公司)
5. 氨卞西林 (上海博光生物科技有限公司)
6. 万古霉素 (北京索莱宝科技有限公司)
7. 头孢噻肟 (北京索莱宝科技有限公司)

1. 营养肉汤培养基（NB）
2. 脑心浸液肉汤 (BHI)
3. AHM (Aeromonas Hydrophila Medium) 鉴别培养基
4. 耐万古霉素肠球菌鉴定培养基(VRE)
5. 甘露醇盐琼脂 (MSA)
6. 含0.5%酵母浸出液的Todd-Hewitt培养基 (THY)

仪器设备

1. 移液器 (Eppendorf公司)
2. 立式压力蒸汽式灭菌锅 (上海博迅实业有限公司医疗设备厂)
3. CO₂培养箱 (Thermo Scientific公司)
4. 恒温振荡培养箱 (上海知楚仪器有限公司)
5. -80 °C冰箱 (Thermo Scientific公司)
6. 分光光度计 (日本岛津公司)
7. 酶标仪 (Thermo Scientific中国有限公司)
8. SPX-250B 型生化培养箱 (上海跃进医疗器械厂)
9. 电子天平 (BEL巴拉特电子有限公司)
10. 生物安全柜 (上海生叉科技有限公司)
    

实验步骤