Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

免疫共沉淀(Co-IP)检测草莓果实中蛋白互作

Protein-protein Interaction Detection in Strawberry Fruit by Co-IP Assay

毛 毛文文
魏 魏灵芝
李 李冰冰
贾 贾文锁

发表时间: 2018年11月29日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010224 浏览次数: 7018

pdf PDF PDF
ask 提问与回复
引用
收藏
被引用
摘要：免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的方法。当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质与蛋白质间的相互作用也被保留下来。用预先固化在beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白，那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来，再通过蛋白变性分离，对B蛋白进行检测，进而证明两者间的相互作用。

Keywords: 草莓果实 search Co-IP search 蛋白互作 search

材料与试剂

  1. 枪头
  2. 离心管
  3. 草莓大绿果或白果
  4. 菌株 (pSPYNE和pSPYCE)
  5. 液氮
  6. 冰
  7. Agarose protein A+G beads
  8. SDS Loading Buffer
  9. 磷酸缓冲液 (pH 7.8)
  10. EDTA
  11. 甘油
  12. TritonX-100
  13. DTT
  14. 蛋白裂解buffer (见溶液配方)

仪器设备

  1. 移液枪
  2. 注射器
  3. 研磨用具
  4. 涡旋振荡器
  5. 离心机

实验步骤

Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：毛文文 , 魏灵芝 , 李冰冰 , 贾文锁 . (2018). 免疫共沉淀(Co-IP)检测草莓果实中蛋白互作. Bio-101: e1010224. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010224.
ris ris 下载引用格式
How to cite: Mao, W. W., Wei, L. Z., Li, B. B. and Jia, W. S. (2018). Protein-protein Interaction Detection in Strawberry Fruit by Co-IP Assay. Bio-101: e1010224. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010224.
ris ris Download Citation in RIS Format

分类

植物科学 > 植物分子生物学

分子生物学 > 蛋白质

您对这篇实验方法有问题吗？

在此处发布您的问题，我们将邀请本文作者来回答。同时，我们会将您的问题发布到Bio-protocol Exchange，以便寻求社区成员的帮助。

post 发布问题
0 Q&A