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草莓果实蛋白提取和Western Blot

Western-blot and Exaction of Protein from Strawberry Fruit

毛 毛文文
魏 魏灵芝
李 李冰冰
贾 贾文锁

发表时间: 2018年11月29日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010222 浏览次数: 3899

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摘要：Western Blot技术常用于蛋白质分析，在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物，然后利用抗原-抗体的特异性反应，从蛋白混合物中检测出目标蛋白，从而定量或定性的确定细胞或组织中目标蛋白的表达情况。

Keywords: 草莓 search 蛋白提取 search Western Blot search

材料与试剂

  1. 枪头
  2. PVDF膜
  3. NC膜
  4. 海绵
  5. 滤纸
  6. 培养皿
  7. 保鲜膜
  8. 甲醇
  9. X-光片
  10. 冰
  11. TBST
  12. 脱脂奶粉
  13. 显色底物
  14. 30% Acr-Bis (29:1)
  15. 分离胶缓冲液 (4x)
  16. 浓缩胶缓冲液 (4x)
  17. 10% APS
  18. TEMED
  19. SDS
  20. Tris
  21. 甘氨酸
  22. NaCl
  23. Tween 20
  24. 浓HCl
  25. 甲醇
  26. Tris-HCl (pH 6.8)
  27. BPB
  28. 甘油
  29. 巯基乙醇
  30. 蛋白提取液 (见溶液配方)
  31. 10%分离胶 (5 ml) (见溶液配方) 
  32. 5%浓缩胶 (2 ml) (见溶液配方)
  33. 电泳缓冲液 (1 L) (见溶液配方)
  34. TBST溶液 (1 L) (见溶液配方)
  35. 封闭液 (见溶液配方)
  36. 转膜缓冲液 (1 L) (见溶液配方)
  37. 5x SDS Loading Buffer (见溶液配方)

仪器设备

  1. 研磨用具
  2. 移液枪
  3. 天平
  4. 涡旋振荡器
  5. 离心机
  6. 电泳仪
  7. 摇床
  8. 4 °C冰箱
  9. 暗盒

实验步骤

Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：毛文文 , 魏灵芝, 李冰冰 , 贾文锁 . (2018). 草莓果实蛋白提取和Western Blot. Bio-101: e1010222. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010222.
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How to cite: Mao, W. W., Wei, L. Z., Li, B. B. and Jia, W. S. (2018). Western-blot and Exaction of Protein from Strawberry Fruit. Bio-101: e1010222. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010222.
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分类

植物科学 > 植物分子生物学

分子生物学 > DNA

分子生物学 > 蛋白质

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