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CTAB法提取草莓DNA

DNA Extraction from Strawberry with CTAB

魏 魏灵芝
毛 毛文文
李 李冰冰
贾 贾文锁

发表时间: 2018年11月29日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010219 浏览次数: 4014

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摘要：植物DNA的提取通常采用液氮研磨的方法破碎植物组织和细胞，通常需在抽提缓冲液中加入巯基乙醇以降低植物细胞匀浆中的多种氧化酶类对DNA抽提的影响。CTAB (十六烷基三甲基溴化铵) 是阳离子去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中可溶，当盐溶液浓度降低到一定程度时从溶液中析出，通过高速离心既可将CTAB与核酸的复合物与蛋白、多糖类物质分离，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀重新溶解于高盐溶液中，再加入乙醇使核酸沉淀，再将沉淀DNA的溶于TE溶液中，即得草莓组织总DNA溶液。DNA的光谱吸收峰在260 nm处，蛋白的吸收峰在280 nm处，测定DNA含量时，通常计算OD260/OD280比值，该值为1.8-2.0时，DNA纯度较高，可进行后续PCR试验。

Keywords: 草莓 search CTAB search DNA search

材料与试剂

  1. 枪头
  2. 离心管
  3. 草莓组织
  4. β-巯基乙醇
  5. 液氮
  6. 氯仿
  7. 异戊醇
  8. 异丙醇
  9. NaAc
  10. 乙醇
  11. Tris-HCl (pH 8.0) (Solarbio, catalog number: T1140)
  12. Na2-EDTA
  13. CTAB
  14. PVP
  15. NaCl 
  16. RNase (Takara, catalog number: 2311A)
  17. RNase-TE溶液 (见溶液配方) 
  18. CTAB缓冲液 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 研磨用具
  2. 移液枪
  3. 水浴锅或烘箱
  4. 离心机
  5. -20 °C冰箱
  6. NanoDrop超微量核酸蛋白测定仪
  7. 电泳仪
  8. 高压灭菌锅

实验步骤

Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：魏灵芝, 毛文文, 李冰冰, 贾文锁. (2018). CTAB法提取草莓DNA. Bio-101: e1010219. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010219.
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How to cite: Wei, L. Z., Mao, W. W., Li, B. B. and Jia, W. S. (2018). DNA Extraction from Strawberry with CTAB. Bio-101: e1010219. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010219.
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分类

植物科学 > 植物分子生物学

分子生物学 > DNA

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