实验原理及目的:气相色谱 (GC) 是一种把混合物分离成单个组分的实验技术 (GC分析流程示意图见图1)。它被用来对样品组分进行鉴定和定量测定。和物理分离 (比如蒸馏) 不同,气相色谱 (GC) 是基于时间差别的分离技术,主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离,将气化的混合物或气体通过色谱柱,基于色谱柱对不同化合物的保留性能不同而得到分离。这样,就是基于时间的差别对化合物进行分离,样品经过检测器以后,被记录的信号就是色谱图,每一个峰代表最初混合样品中不同的组分峰。出现的时间称为保留时间,可以用来对每个组分进行定性,而峰的大小 (峰高或峰面积) 则是组分含量大小的度量。氢火焰检测器 (FID) 是通用型检测器。采用气相色谱法测定果实中的糖酸类物质不仅能对其进行准确的定性定量分析,而且具有灵敏、快速和操作简便等优点。
图1. GC分析流程图 材料与试剂
- 枪头
- 2 ml离心管
- 10 ml离心管
- 2 ml上样瓶 (GC专用)
- 柑橘果汁或冻样
- 糖
- 葡萄糖
- 果糖
- 肌醇
- 苹果酸
- 柠檬酸
- 奎宁酸
- 六甲基二硅胺烷 (hexamethyldisilazane, HMDS)
- 三甲基氯硅烷 (trimethylchlorosilane, TMCS)
- 盐酸羟胺
- 甲醇
- 吡啶
- 浓硫酸
- 甲基-α-D-葡萄糖苷 (methl-α-D-Glucopyranoside, Sigma-Aldrich)
- 纯蒸水
仪器设备
- 容量瓶 (1 ml,2 ml,4 ml,8 ml,16 ml,50 ml)
- 量筒
- 三角瓶
- 离心管架
- 电子秤
- Agilent 7890A气相色谱仪
- 气相色谱自动进样器
- 安捷伦气相色谱系统化学工作站
- 氢火焰离子化检测器
- Effendorf真空旋转浓缩仪
- Effendorf高速离心机
- 水浴锅
- 超声波仪器
- -80 °C超低温冰箱
- 4 °C冰箱
- 研磨设备
- 通风橱
- 移液器
实验步骤
Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
分类
植物科学 > 植物生物化学 > 糖类
生物化学 > 糖类 > 葡萄糖
生物化学 > 其它化合物 > 苹果酸
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