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磷酸盐缓冲液(PBS)配制指南
Authors: Yun Shi and Miao He, updated date: , view: 77, Q&A: 0
Tags: 磷酸盐缓冲液, PBS and 常用试剂

Materials and Reagents

试剂

分子式

分子量

品牌

货号

十二水合磷酸氢二钠

Na2HPO4.12H2O

358.14

沪试

10020318

磷酸二氢钾

KH2PO4 

136.09

沪试

10017618

氯化钠

NaCl

58.44

沪试

10019318

氯化钾

KCl

74.55

沪试

10016318

miniQ水

/

/

/

/

锡箔纸

/

/

/

/


Equipment

1. 量筒、烧杯、耐高温高压蓝盖玻璃瓶(Thermo fisher);

2. Rapid-Flower Filter(滤器)(Thermo Nalgene)

Procedure

以配制1L  10×PBS储存液为例:

1、  用双蒸水清洗量筒、烧杯、10×PBS储存液玻璃瓶(3次)。

2、  使用一次性称量船,分别用分析天平称取Na2HPO4.12H2O35.814gKH2PO42.4496gNaCl80.0669gKCl2.0129g

3、  将药品粉末倒入PBS配制专用烧杯中,加入800-900ml miniQ水,使用磁力搅拌器充分溶解(无任何固体)。

4、  用移液枪吸取2-3ul溶液滴在pH试纸上测试酸度,pH应为6.8

5、  将溶液转移到PBS专用量筒或容量瓶中定容到1L(加miniQ水至1L),倒回烧杯中充分混合。

6、  将滤器与微型台式真空泵相连,打开微型台式真空泵后,将PBS分批倒入滤器进行过滤。滤器价格昂贵,建议一次过滤4-5L溶液。

7、  滤好的10XPBS可立刻稀释使用;稀释后可用pH试纸再次确认pH值。

8、  暂时不用的10XPBS分装至10×PBS储存液玻璃瓶中(液面不超过瓶身的3/4高度),高压灭菌。
注意事项:瓶盖不能完全拧紧(保留约半圈),用锡箔纸包裹瓶盖;不能放到底层篮子,容易被脏水污染;降温后一旦打开灭菌锅,必须立刻拧紧盖子,防止外界细菌进入。

9、  灭菌后的10XPBS可保存在室温或4冰箱中。每次分装后需盖紧瓶盖,降低污染概率。

10、取用前注意观察瓶底有无沉淀,摇晃后有无悬浮物;若有说明有微生物滋生,请勿使用,需重新配置。

11、每配500ml1XPBS可用50ml进口管测量50ml 10XPBS,加入450ml miniQ水,颠倒混匀。

 


Recipes

试剂

分子质量

10×储存液浓度(mol/L )

配制1L
  所需质量(g)

配制2L

所需质量(g)

配制4L

所需质量(g)

配制5L

所需质量(g)

1X工作液浓度(mol/L )

配制1L
  所需质量(g)

Na2HPO4.12H2O

358.14.

0.1000

35.814

71.628

143.256

179.07

0.0100

3.5814

KH2PO4

136.085

0.0180

2.4496

4.8992

9.7984

12.248

0.0018

0.24496

NaCl

58.443

1.3700

80.0669

160.1338

320.2676

400.3345

0.1370

8.00669

KCl

74.552

0.0270

2.0129

4.0258

8.0516

10.0645

0.0027

0.20129

pH=7.4

10×PBS储液的pH是6.8,稀释为1×PBS时,pH变为7.4。


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