水稻叶片Na⁺，K⁺含量测定(火焰光度法)
Determination of Na⁺, K⁺ Content in Rice Leaf (Flame Photometric Method)   

材料与试剂

1. 50 ml离心管
   
2. 尼龙66滤膜 (津腾，13 mm x 0.22 μm)
   
3. 注射器 (金塔，0.45X16 RW，catalog number: LBPYA001132Q)
   
4. 液氮 (湖北省畜牧局制氧厂)
   
5. 1 M HCl (国药试剂，分析纯)
   
6. NaCl (国药试剂，分析纯)
   
7. KCl (国药试剂，分析纯)
   
8. 燃料：98#汽油
   

仪器设备

1. 恒温箱
   
2. 研钵和研磨棒
   
3. 电子天平
   
4. 摇床
   
5. 容量瓶
   
6. 火焰光度计 (上海精科FP640)
   
7. 液化气燃烧泵 (属火焰光度计的附件，无特定型号，同属上海精科生产)
   

实验步骤

1. 取样，80 °C恒温箱烘干样品使样品中的水分完全丧失后用液氮仔细磨碎样品，若有必要则需重新烘干样品，称取0.1 g样品粉末至50 ml离心管，加入20 ml 1 M HCl。
   
2. 室温(25 °C)摇床下震荡样品> 3 h使细胞破碎，用套有滤头(尼龙66)的注射器过滤样品残渣，将过滤后的样品清液转移至新管中。
   
3. 取适量步骤2所得抽提液，用1 M HCl稀释至合适浓度 (胁迫条件下稀释10倍)，混匀待测。
   
4. 在容量瓶中配制1,000 mg/L NaCl和KCl的标准母液 (NaCl和KCl粉末在称取前需烘干以去除结晶水)。
   配制标准曲线用的NaCl和KCl浓度梯度：

   Na标样(μg/ml)	K标样(μg/ml)
   0 (1 M HCl)	0 (1 M HCl)
   5	5
   10	10
   20	20
   50	50
   100
   150

5. 利用上海精科FP640火焰光度计测定样品Na⁺，K⁺含量：打开电源和汽油燃烧泵，点火后调节进气速度使火焰呈锯齿状，预热30 min。
   
6. 校准仪器，将CK(1 M HCl)对应的测定读数调至最小值0，最高浓度液体调至150 (Na⁺)和50(K⁺)。
   
7. 测样品，记录读数。
   
8. 根据NaCl和KCl的标样测量数据绘制标准曲线，计算样品中Na⁺，K⁺浓度。
   

注意事项

1. 待测样品上样前需过滤，否则容易堵塞火焰光度计进样孔。
   
2. 待测样品的浓度不宜过高，会影响准确性，应稀释后使浓度保持在中间量程。
   
3. 在测定中为了稳定火焰和排除一些元素的干扰，常在测定液中加入“缓冲剂”，如K⁺，Ca²⁺，Mg²⁺同时存在将对彼此测定产生影响，如果把这三种元素配成饱和溶液为“缓冲剂”，在试液中加到一定量时，则产生的影响是单一恒定值，可作本底扣除，测定Na⁺时，大量HCO₃^- 的存在可使结果偏低，可用盐酸酸化试液后加热除去。