材料和试剂

大鼠
乙醇
目标
1. 半透明紫色乙烯基索引卡分隔符（Oxford Esselte，目录号：73153）
2. 啮齿类食物
3. 无菌瓶盖
目标是切成2“直径圆形的塑料片。我们使用Oxford Esselte提供的半透明紫色乙烯基索引卡分隔器，但过去已成功使用了啮齿动物食物盘和消毒瓶盖。平坦的乙烯基靶材具有吸引力，因为它们易于清洁，并且相比于盘子或帽子，对老鼠来说探索和携带的吸引力较小。无论使用哪个目标，单个实验中使用的目标都应该彼此相同。
饵
1. Froot Loops 麦片（或普通的等同物）
2. 果味卵石^{®或可可卵石（每个目标一颗卵石）}
对于诱饵，我们使用Froot Loops 谷物（或通用等价物），分成四分之一块（每个目标四分之一），或者Fruity Pebbles ^{®或Cocoa pebbles ^{®（每个目标一颗卵石）。所有的工作同样好。}}
配置模板
在预训练期间，目标是随机放置的，不需要模板（请参见过程）。然而，在测试试验中，目标的空间布局至关重要。为了这个目的，我们创建了一个模板，用于剪切以填充整个舞台地板。孔（大约2.5“直径）在将被放置的目标的posterboard被切开。在每次试验前，将模板置于旷场中，然后将目标放入孔中。
然后，模板可以从露天场地中抬出，使目标精确地位于竞技场中。

设备

Open Field Arena（图1）
这些动物在胶合板制成的90 x 90 x 75厘米开阔场地中进行测试。它被涂成白色，地板上画着黑色的格子。任何大型标准露天场地都应该有效，不过应该一致地使用相同类型的场地，因为场地的大小和形状预计会影响任务绩效指标。

图1.带有十个诱饵目标和一只老鼠的露天场地照片
秒表
一个简单的秒表（分钟/秒）用于计时任务中的动物。
摄像机
录制高清视频文件到SD卡的摄像机用于记录所有试验。摄像机分辨率必须足以查看（1）在低照明条件下是否有一块诱饵已从目标上移除，以及（2）动物的触须（胡须）是否与目标接触。
白噪声发生器（例如，HoMedics，型号：SS-2000G / F-AMZ）
我们使用标准家用白噪声发生器HoMedics SS-200G / F-AMZ。设计用于家庭或实验室使用的任何标准型号的白噪声发生器都是合适的。白噪声发生器有助于掩盖任何由于测试室内或附近的外部声音而造成的干扰，从而减少任务中的行为变化。

程序

处理/控制动物
请参阅图2以获取整个实验时间表的示意图。在测试之前，在实验中将要处理动物的个体应该每天开始处理（拾起并保持）每只动物几分钟。如果诱饵是一种用于老鼠的新食品，那么每天也可以提供几片麦片以使老鼠适应食物。
在开始预训练前至少4天处理动物，但理想的是5-7天。

图2.实验时间表整个实验需要大约18-24天，包括处理，预培训和测试。整个时间线在此图中用图表示。
剥夺食物
在培训前2-3天，应开始剥夺食物。首先记录所有动物的基线重量，然后将所有食物（但不包括水）移走24小时。 24小时后，应每日提供有限的食物（约40克/只）。应该每天对大鼠称重，每天提供的食物量应该调整，以便动物维持大约85-90％的基准体重。
习惯
在大约2-3天的食物剥夺之后，实验的第一天就是习惯化。习惯和所有其他训练应在大鼠的黑暗周期中进行，每天大约在同一时间（即在2小时的时间窗内，）。
1. 测试室内的灯光应该变暗至视频摄像机可以工作的最低级别 - 如果有红灯可用，则实验可以在黑暗中用红灯运行。白噪声发生器应该打开。
2. 将动物单独放入开阔场地，并允许探索10分钟。在10分钟结束时，将动物从竞技场中移出，返回到它们的笼子并喂食。
3. 在习惯化和所有预培训和测试试验期间，实验者应该离开房间（通过摄像机监视大鼠），或者静静地坐在远离旷野的位置。测试室内不应有食物，饮料，乳液，香水，珠宝，音乐或其他令人分心的刺激物。
4. 在老鼠之间，应该用乙醇溶液擦拭竞技场以清洁和分散气味线索。
预培训
习惯一天后，预培训开始。照明和白噪声等所有环境条件应与习惯期间保持一致。预培训分阶段进行，动物需要完成每个阶段才能转入下一阶段。动物每天在预培训期间接受一次试验。因此，完成预培训的时间可能会有所不同，动物通常需要大约10-14天。
1. 对于预训练的第一阶段，四个目标随机放置在竞技场，每个目标上有一个诱饵。将一只老鼠放置在指定的起点，并且允许捕获诱饵。试验结束时，大鼠取回所有四个诱饵，或10分钟时，以先发生者为准。
  。当动物在两次连续的试验中成功检索到所有四种诱饵时，预培训的第一阶段就完成了
2. 对于第二阶段，六个目标被放置在舞台上，每个都有一个诱饵。
  第二阶段是在老鼠在一次试验中成功取回所有六个部分时完成的。
3. 第三阶段，八个目标放在竞技场内，每个目标都有一个诱饵;完成要求在一次试验中成功检索所有八个部分。
4. 最后，在第四阶段，将10个诱饵目标放置在竞技场中。当动物连续三次试验成功地从十个目标中检索出九个时，第四阶段和预先训练完成。此时，动物可以开始实验的测试阶段。
测试阶段
在测试阶段，动物会在竞技场中被观察到，其具体目标配置旨在回答特定的测试问题。
1. 首先将配置模板放置在竞技场地板上，然后放置诱饵目标，最后在将老鼠放入竞技场之前将模板移除。如在训练前一样，记录大鼠的行为10分钟，或者直到大鼠找回所有诱饵，以先发生者为准。
2. 试验后，将老鼠放回家笼中喂食。配置的细节（目标数量，目标位置，不同配置的数量）将取决于实验问题。在以前的研究中使用的配置（例如，Blaser和Ginchansky，2012）可以用作参考;有关四个10目标配置的示例，请参见图3。除非测试不同配置的顺序由实验问题确定，否则当使用多种配置时，应该在大鼠之间平衡序列。
  在视频1中查看大鼠在测试试验中的行为。
图3.四个示例目标配置。 A.简单基线; B.最近邻居充分; C.分组方法; D.最近邻居不足。图3提供了四个示例配置，所有配置都有10个目标。在3A中，确定基线动机和运动活动的简单基准配置。在3B中，简单最近邻策略产生最佳路线的配置。在3C中是确定目标集群偏好的配置。在3D中，简单最近邻策略产生次优路线。
视频编码和分析
一旦试验完成，视频文件就会被编码用于多种行为测量。首先，每个目标都被赋予一个唯一的编号。必须为每个配置确定最佳路线（最短路径）。
联系人：当被摄体的胡须，鼻子或前爪接触目标或诱饵时，会记录与目标的接触。不计算动物的尾巴或后爪与目标接触。
检索：当主体从目标中移除诱饵时记录诱饵的检索（因此所有检索分数将自动计为与该目标的联系）。这些记录在数据文件中记录为一个目标号码列表，以及一个额外的标志（例如，颜色代码或突出显示）来指定检索。

视频1
转场：转场是根据目标联系人序列计算的。转换定义为连接两个连续联系人的线段。例如，如果主题联系目标2和目标4，则会记录从2到4的转换。这为每个试验的每只动物建立了一系列转换。最佳过渡是沿着最佳路线连接目标对的区段。每个目标对之间的距离（厘米）用于计算每个主题的总行程距离。因为过渡用于计算距离度量，所以这些度量不考虑两个目标之间最短路径的偏差。如果需要，还可以通过视频跟踪程序（如Ethovision ^{®，Anymaze ^{®或ViewPoint ^{®）播放视频至建立实际的行程距离。
记忆措施
重访：重游被定义为在检索到该目标的诱饵之后与目标的任何联系。
省略：省略定义为在10分钟试用期内未访问的任何目标。
跨度：跨度定义为第一次重访之前访问的目标数量。
路线选择措施
<优化以上的百分比：高于最优的百分比（PAO）计算为总行程距离和最佳路线距离之间的差异除以最佳路线距离。较低的分数表示较好的表现，因为较低的分数表示较短的路径长度。
最佳转换的比例：最佳转换的比例计算为沿最佳路径下降的转换次数除以总转换次数。
最佳距离比例：最佳距离比例定义为沿最佳路线行进的总距离除以总行程距离。}}}

数据分析

最常见的情况是，行为测量可以在两个实验组之间进行比较，如果只使用两个组，或者使用ANOVA（如果需要多个组或重复测试）。我们通常使用异常值的标准定义作为一个主体，他们的平均值至少高于2个标准偏差 - 这些都被排除在分析之外。

致谢

这一系列研究的最初灵感来自与Ed Chronicle博士的讨论，我非常感谢他。最近的工作得到了圣地亚哥大学教授研究基金的支持。作者没有利益冲突要申报。

参考

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