材料和试剂

手套和实验室套装（C uta uta uta sap sap sap sap on on on on on on）））））
成熟的Cuscuta （例如，Cuscuta reflexa ;参见注1）培养）
推定寄主植物

设备

称重机/天平（质量范围在0.01-100 g之间）
木制种植棒（竹子;直径适合特定寄主植物茎直径），可在园艺店铺购买
裁剪剪刀C uta ots ots ots ots

程序

整个实验在宿主植物的最佳条件下进行。最佳宿主植物条件由种子供应商提供，不能推广。

将Cuscuta 切开（长度〜15厘米），包括成熟植物的枝梢，并将其缠绕在直立的木棍上;请注意卷绕方向（从底部到顶部逆时针旋转;图1A）和尖端的完整性（另见注2）。将Çusc uta the the the the shoot shoot shoot shoot shoot for for for for for for for for by by））））））））））））。）。。。。。。。。。。。。。 C uta> shoot shoot shoot shoot by>>>>>> rod>>>。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。

图1.启动咳嗽感染 A.咳嗽反射射击木棍。卷绕方向从下到上是逆时针方向。红框表示最有可能形成的区域。 C.镰刀菌反射在N周围伤口。本木本植物在木条（A）附近预处理后。
一天之后（在排气开始形成时），当从棒上小心地放出拍摄时，称重拍摄并将其转移到主机上，考虑到卷绕方向（另见注3）。饵料会形成接近枝梢（图1，红色盒子），因此请确保将本部分彻底卷绕在宿主植物茎上。 C uta uta uta shoot shoot shoot shoot shoot。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。因此，相同的长度（例如，15±1cm）以及大约相同的重量（例如，0.5-0.7g）的寄生虫芽是相关的可重复的结果。
转移后（图1B，另见注4），让我们的Cuscuta spp。芽生长在同一时期（14-21天）。在生长之后，从宿主植物中除去单个芽，并立即测量每个个体的鲜重。

数据分析

Cuscuta 的能力和积累生物量的速度取决于获取营养物质的数量，因此，在一段时间内，单次拍摄需要建立与宿主血管组织的成功连接。因此，"蔡司"增长的差异偶尔会很高。建议使用大量（> 10）重复和重复。该实验的结果是对于每个单独的Cuscuta 拍摄在不同时间段的生物量（g）的增益。因此，可以通过其在两个不同组的宿主植物上获得生物量的能力来量化并对其进行比较以抵抗镰孢霉素（或感染的易感性）。如果初始重量没有很大变化，则不需要校正因子，如果在时间内显示结果作为质量变化（ΔFw=最终枝条重量 - 初始枝条重量）可能有帮助的情况，则更少）帧。这取决于实验者将会执行的具体实验来回答他们的研究问题结果可以以两种类型的宿主植物的标准偏差作为n重复的猕猴桃苗生物量21dpi（感染后天数）的平均值来表示。
为了减少异常值效应，可以使用诸如Mann-Whitney -test之类的分级数据分析和非参数测试。
另见注5。

笔记

可以在许多植物上栽培猕猴桃： Cuscuta 的种植。在我们的实验室里，我们使用了Coleus（Solenostemon scutellarioides），因为它是一个强壮的植物，它的红色与斑点Cuscuta 射击形成良好的对比。当您靠近6到10个寄主植物时，您可以轻松培养"蔡司"（Cuscuta），以便茧丝虫可以将其全部覆盖。重要的是要考虑到，在Cuscuta 过度繁殖宿主植物后，不能再盆栽，因此请确保为宿主植物提供足够的营养。镰刀菌应在日照条件下培育17小时。可以在大学植物园或其他研究小组中要求蔡司的种子和说明如何开始培养。
围绕木制种植棒预先蜿蜒的Cuscuta有利于宿主植物的后期感染，这是由于有效的排尿前体形成，在枝条接触部位的枝条清晰可见的肿胀。 >
在初始体重测量和转移到主机厂期间，不要伤害蔡斯库射击是很重要的。
在感染的第一天，尽管感染了它所在的植物，但是Cuscuta 拍摄可以在宿主植物的周围区域搜索其他宿主。因此，实验者必须轻轻地将拍摄重定向到其主机。
实验的盲目设置：比较例如， N。在Hegenauer等人的盲目实验中进行了具有抗性转基因CuRe1表达植物的本地植物野生型植物。（2016）。一个人随机分配数字给每个被测试的植物，第二个人使用镰刀菌反射进行感染。
通过咳嗽反射成功感染Coleus如图2所示。在抽搐感染的一侧，Cuscuta 增厚（红框）。感染成功后，Cuscuta 开始生长和分支（蓝色箭头）。

图2.由蔡斯反射成功感染的科莱斯。红框：发育的两侧。蓝色箭头：蔡司的分支。

致谢

这项工作由DFG-grant（AL1426/1-2）资助。

参考文献

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Kaiser，B.，Vogg，G.，Furst，UB和Albert，M。（2015）。 Cuscuta属的寄生植物及其与敏感和抗性宿主植物的相互作用。前植物科学 6：45 。

Lanini，WT和Kogan，M.（2005）。生物与管理在Cuscuta 中的作物。 Cienc Investig Agrar 32：165-179。