材料和试剂

无菌酒精制备垫（Covidien，目录号：6818）
培养皿（Corning，Falcon ，目录号：353003）
组织粘合剂（3M，目录号：1469SB）
6周龄SCID小鼠（Charles River Laboratories International，目录号：236）或无胸腺裸鼠（Envigo，目录号：069）
盐酸氯胺酮/盐酸赛拉嗪溶液（Sigma-Aldrich，目录号：K113）
磷酸盐缓冲盐水（PBS）（Mediatech，目录号：21-040-CV）
70％乙醇（Decon Labs，目录号：2401）

设备

不锈钢无菌手术刀（Integra LifeSciences，Miltex ，目录号：4-423）
操作剪刀（Sklar Surgical Instruments，目录号：13-1045）
微解剖钳（Roboz Surgical Instrument，目录号：RS-5135）
生物安全柜（Labconco，目录号：3460001）
动物设施中的CO 2腔室
加热垫（Sunbeam Products，目录号：000765-500-000）

程序

通过手术或活检程序（F0）收集原发性肿瘤。
麻醉SCID小鼠使用氯胺酮盐酸盐/盐酸赛拉嗪溶液
从背部区域取出头发。
切割肿瘤（F0）成块。
使用剪刀在SCID小鼠的背部区域做一个浅切口，然后在从患者收集原发性肿瘤组织后3小时内将两片原发性肿瘤皮下植入SCID小鼠的肩胛间脂肪垫。这些处于移植阶段的小鼠称为F1小鼠（SCID小鼠用于F1小鼠，因为其移植率高于无胸腺裸鼠）。
将F1小鼠移动到加热垫上的温暖区域，并在恢复期间监测它们
将F1小鼠返回常规小鼠无菌室
当肿瘤生长并达到约1.5cm（4-10周）时，准备额外的移植
将F1小鼠放在CO 2室中5分钟以使其安乐死。
将安乐死的小鼠移入生物安全柜，并使用无菌酒精制备垫清洁整个小鼠
切除肿瘤区域周围的皮肤。
切除肿瘤并将肿瘤转移到含有PBS的无菌培养皿（视频1）
将肿瘤切成均匀尺寸（，<2mm> 3 ）（视频1）。

图1. PDX模型的建立 A.小鼠（F3小鼠）中代表性小细胞肺癌（SCLC）PDX的照片。 B.来自SCLC PDX的肿瘤组织在小鼠中的H& E组织学。 TKO代表提供原发性肺肿瘤组织的Taofeek K. Owonikoko博士
麻醉无胸腺的裸鼠，如步骤2所述。
如步骤5中所述，将一块肿瘤植入每个实验无胸腺裸鼠。将组织粘合剂应用于皮肤的切割表面。在该扩增期的小鼠称为F2小鼠。 2-4周后，肿瘤可见，如图1和视频2
将F2鼠标移动到温暖的区域，按照步骤5所述进行监控。
将F2小鼠返回常规小鼠无菌室。
当肿瘤体积达到100-150mm 3 时，小鼠可用于下游应用

笔记

确保所有程序都应在生物安全柜中进行。
确保任何坏死肿瘤组织不用于移植（图2）。
确保只有早期传代的PDX（小于5 ^th段）可用于研究。

图2.代表性非坏死组织和坏死组织的照片

致谢

我们感谢埃默里大学研究专家助理教授Taofeek K. Owonikoko博士和提供原发性肺肿瘤组织的郭国景博士。这项工作由NCI，国家卫生研究院拨款1R01CA193828，2R01CA136534和1R01CA200905-01A1支持。

参考文献

Hidalgo，M.，Amant，F.，Biankin，AV，Budinska，E.，Byrne，AT，Caldas，C.，Clarke，RB，de Jong，S.，Jonkers，J.，Maelandsmo，GM，Roman-Roman ，S.，Seoane，J.，Trusolino，L.和Villanueva，A。（2014）。患者衍生的异种移植物模型：用于翻译癌症研究的新兴平台 Cancer Discov 4（9）：998-1013。
Kopetz，S.，Lemos，R。和Powis，G。（2012）。患者衍生的异种移植的希望：小鼠和男人最好的计划。 Clin Cancer Res 18（19）：5160-5162。
Wilding，JL和Bodmer，WF（2014）。癌症用于药物发现和开发的细胞系。 Cancer Res 74（9）：2377-2384。