材料和试剂

设备

无菌14ml聚苯乙烯培养管（VWR International，目录号：60818-725）
无菌1μl塑料环（Santa Cruz，目录号：SC-200266）
用于吸光度读数的分光光度计
37℃振荡培养箱
微流体通道模具（图1）

图1.微流体通道。每个通道的深度为100μm，宽度为500μm。通过使用标准软光刻技术在硅晶片上沉积SU-8 2150来制造10个通道（Xia和Whitesides，1998）。此设备允许10次并行实验。
SU-8 2150（MicroChem Corp.）
玻璃片（75×50mm）（Ted Pella，目录号：26005）或盖玻片（75×50mm）（Ted Pella，目录号：260462）
镜头纸
干燥器带真空管道
外刀或手术刀
5ml注射器（BD，目录号：309647）
聚乙烯管（ID 0.58mm，OD 0.965）（BD，Intramedic TM ，Clay Adams ，目录号：427411）
Harris Unicore打孔器（1.20mm）（Ted Pella，目录号：15074）
手持电晕发生器（实验室电晕处理器，电子产品，型号：BD-20AC）
带有10针注射器支架适配器（Harvard装置）的注射泵
具有自动聚焦/平台系统的荧光显微镜（例如，配备有Andor iXon-885和40x长工作距离物镜的Nikon TE2000-E）

软件

程序

将模具放入一个150毫米×15毫米的培养皿，图案的一面朝上。
制备25ml的PDMS混合物。在塑料称重船，重10 然后加入1份固化剂。彻底混合至少一分钟，然后倒在硅主板上。
将盘放在干燥器中，在真空下脱气1小时。它是重要的是在固化之前从PDMS中除去所有气泡
在37℃培养箱中固化PDMS 24小时，或者在65℃固化2小时。
注意：请阅读制造商关于固化PDMS的建议。
固化的PDMS应该是坚硬的触摸。使用锋利的刀片（切割刀或手术刀）小心地切出了所有的车道单个，矩形件。图案化微通道将是可见的在PDMS中。用玻璃纸胶带覆盖通道，以防灰尘颗粒和碎片
在通道入口和冲孔处打孔出口与1.2毫米哈里斯Unicore打孔器。注意移除PDMS插塞。取下玻璃纸胶带。彻底清洁 PDMS装置和具有100％乙醇和透镜纸的载玻片以除去任何碎片。
将载玻片和PDMS通道侧向上放置一个干净的平面。大约握住手持式电晕发生器在表面上1-2厘米。在每个表面上均匀地处理30秒。
小心地将PDMS设备放在处理过的载玻片上，其中微通道图案面向载玻片。应用温和，手动均匀压力，确保均匀密封。必须小心不要施加太大的压力，这可能导致通道崩溃。在65℃的最终结合步骤15分钟后，装置准备好使用。