第一部分:NBT染色检测超氧阴离子(O2-) 实验原理:氮蓝四唑 (NBT, nitroblue tetrazolium) 与超氧阴离子发生反应并形成蓝色的甲臢 (formazan)。 实验目的:定性、原位检测水稻各组织中的超氧阴离子(O2-)。
关键词: 活性氧, 氮蓝四唑, 超氧阴离子, 水稻, 生理指标
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
溶液配方
第二部分:DAB染色检测过氧化氢 实验原理:当过氧化物酶存在时,二氨基联苯胺 (3,3’-diaminobenzidine, DAB) 被双氧水氧化生成不溶于水的暗棕色颗粒。 实验目的:定性、原位检测水稻各组织中的双氧水. 关键词:水稻,生理指标,活性氧,过氧化氢,二氨基联苯胺
注意事项
NBT染色和DAB染色时,需注意取样部位的不同对定性结果造成的影响。例如,对不同胁迫环境下的同一批植株进行取样,最好取生长时期相同的植株上相同部位的叶片染色进行比较。
第三部分:过氧化氢定量测定 实验原理:当过氧化物酶存在时,过氧化氢和10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪(10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine, ADHP)在过氧化物酶催化下产生荧光产物试卤灵(resorufin)。用酶标仪对试卤灵进行测定可计算出过氧化氢的含量。 实验目的:定量测定水稻各组织中过氧化氢含量。 关键词:水稻,生理指标,过氧化氢
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