Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

水稻叶片叶绿体蛋白分离及检测

Isolation and Detection of Chloroplast Protein from Rice Leaves

都 都浩
马 马斯琦
熊立仲 熊立仲

发表时间: 2018年04月27日 DOI: 10.21769/BioProtoc.1010123 浏览次数: 5320

返回专辑目录

Rice Protocol eBook
pdf PDF PDF
ask 提问与回复
引用
收藏
被引用
实验原理：水稻叶绿体是水稻光合作用和多种激素合成的场所，很多核编码蛋白及叶绿体编码蛋白在叶绿体中发挥重要功能。水稻叶绿体蛋白的分离需先用机械研磨叶片，进行percoll密度梯度离心，以分离出完整未破损叶绿体，再用细胞裂解液将叶绿体裂解，分离出叶绿体蛋白。
实验目的：分离叶绿体蛋白，研究蛋白的定位、功能及质核信号的传导。

Keywords: 水稻 search 叶绿体蛋白 search 分离检测 search

材料与试剂

  1. 75目细胞筛
  2. 50 ml圆底离心管
  3. 各种型号枪头
  4. 水稻叶片
  5. 液氮
  6. Sorbitol (Biotech, catalog number: S0691)
  7. Tricine (Sigma, catalog number: T0377)
  8. DTT (Sigma, catalog number: 43815)
  9. EDTA (Sigma, catalog number: E6758)
  10. MgCl2 (Sigma, catalog number: M9272)
  11. BSA (Roche, catalog number: BP0045)
  12. Lysis buffer (pH 7.85)
  13. Tricine
  14. Glycerol (国药，catalog number: 1001618)
  15. PMSF (Sigma, catalog number: P7626)
  16. Percoll (GE, catalog number: 17-0891-09)
  17. Cysis buffer
  18. 5x Sample buffer
  19. 2.5x CIB (chloroplasts isolation buffer), pH 7.85 (见溶液配方)
  20. Lysis buffer, pH 7.85 (Completely Soluble Mixture of Chloroplast Components) (见溶液配方)
  21. 40% percoll (见溶液配方)

仪器设备

  1. 研钵
  2. 天平
  3. 高速离心机
  4. 量筒
  5. 水浴锅
  6. 电泳仪
  7. 移液枪
  8. Western blot装置 (Mini-PROTEAN from Bio-Rad, catalog number: 164-8003)

实验步骤

Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：都浩, 马斯琦, 熊立仲. (2018). 水稻叶片叶绿体蛋白分离及检测. Bio-101: e1010123. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010123.
ris ris 下载引用格式
How to cite: Du, H., Ma, S. Q. and Xiong, L. Z. (2018). Isolation and Detection of Chloroplast Protein from Rice Leaves. Bio-101: e1010123. DOI: 10.21769/BioProtoc.1010123.
ris ris Download Citation in RIS Format

分类

分子生物学 > 蛋白质 > 分离

植物科学 > 植物分子生物学 > 蛋白质

您对这篇实验方法有问题吗？

在此处发布您的问题，我们将邀请本文作者来回答。同时，我们会将您的问题发布到Bio-protocol Exchange，以便寻求社区成员的帮助。

post 发布问题
0 Q&A