实验原理:CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,可溶解细胞膜,并与核酸形成复合物。该复合物在高盐溶液中 (>0.7 mol/L NaCl) 可溶,并可稳定存在。通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
实验目的:快速提取植物基因组DNA,可用于PCR检测,对转基因植株进行初步分子鉴定。
材料与试剂
- 1.5 ml (或2 ml) 离心管
- 水稻叶片
- CTAB (Bio Basic INC., catalog number: GB0308 BJ0011J)
- Tris (进口分装)
- 浓盐酸 (中平能化集团开封东大化工有限公司试剂厂)
- NaCl (国药集团有限公司,分析纯)
- EDTA
- 氯仿 (国药,分析纯)
- 异戊醇 (国药,分析纯)
- 95%乙醇 (国药,分析纯)
- 1.5x CTAB配方 (见溶液配方)
仪器设备
- 离心机 (Sigma, Beckman)
实验步骤
Copyright: © 2018 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
分类
分子生物学 > DNA > DNA 提取
植物科学 > 植物分子生物学 > DNA
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