DNA Extraction, Amplification and High-throughput Sequencing of Soil Nematode Community

摘要：应用高通量测序技术开展土壤线虫多样性研究，能够克服形态学鉴定所需的时间长和专业知识的限制，为在大尺度上开展土壤线虫生态学研究提供了技术保障。虽然高通量测序技术可以快速、高效的分析大量土壤样品的线虫群落组成，但利用土壤试剂盒提取线虫DNA并进行高通量测序得到的测序深度较低，线虫序列占真核生物总序列的比例较小。本文针对目前利用高通量测序技术开展线虫研究存在的线虫富集以及线虫DNA提取等方面的问题，对提取土壤线虫DNA的方法进行了改进。通过对线虫提取方法的优化和线虫试剂盒的筛选，研究结果表明：浅盘法结合贝尔曼漏斗法对线虫进行提取、物理去杂，并使用DNeasy Blood & Tissue试剂盒提取线虫DNA，能够提高线虫的提取效率和测序深度，为利用高通量测序技术开展土壤线虫群落研究提供了技术参考。

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