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发表时间: 2021年04月23日 DOI: 10.21769/BioProtoc.2003811 浏览次数: 4854
方法一: 嗜盐细菌分离保藏方法
摘要:盐湖环境具有高渗透压或高pH等特点,生长条件苛刻,但却蕴藏着丰富、独特、宝贵的嗜盐微生物资源,如嗜盐细菌,嗜盐放线菌和嗜盐古菌等。生长在高盐环境中的微生物往往需要一定的盐浓度,从而保持正常生理所需的渗透势。因此,在分离嗜盐菌时,需在分离培养基中添加合适的盐,以期获得具有不同渗透特性的微生物类群,从而提高分离菌株的多样性。实验者也可根据自身样品的理化性质对分离培养基和培养条件进行优化和调整,以达到更好的分离效果,充分发掘盐湖环境微生物资源。本部分阐述的方法适用于在实验室条件下分离培养盐湖环境中的嗜盐细菌,初步了解盐湖可培养嗜(耐)盐细菌类群。本实验所获菌株根据需要,分别采用以甘油为保护剂和以牛奶为保护剂的方法进行高效保藏,为后续新分类单元的鉴定、功能菌株的筛选以及代谢产物的发掘提供优质的微生物资源。
Keywords: 盐湖材料与试剂
仪器设备
| 仪器名称 | 型号 | 生产厂家 |
| 立式压力蒸汽灭菌器 | LDZH-100KBS | 上海申安医疗器械厂 |
| 电热恒温培养箱 | GHP-9160 | 上海天呈实验仪器制造有限公司 |
| 烘箱 | XMTD-8222 | 上海精宏实验设备有限公司 |
| 迷你离心机 | LX-200 | 江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司 |
| 小型振荡器 | MS 3 basic | 德国IKA |
| PCR仪 | C1000 | 美国Bio-RAD |
| 洁净工作台 | SW-CJ-2FD | 上海博迅医疗生物仪器股份有限公司 |
| 电子精密天平 | BSA 124S | 德国Sartorius |
| 电子分析天平 | TE 1502S | 德国Sartorius |
| 冰箱 | BCD-308W | 青岛海尔股份有限公司 |
| 超低温冰箱 | UXF70086V | Thermo SCIENTIFIC |
| 制冷型卧式摇床 | TS-211B | 上海天呈实验仪器制造有限公司 |
软件和数据库
MEGA 7.0 (https://www.megasoftware.net/) (Kumar et al., 2016)
EzBioCloud (https://www.ezbiocloud.net/) (Yoon et al., 2017)
实验步骤
分类
系统生物学 > 微生物组学
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