材料与试剂

一、耗材

1. 一次性培养皿 (江苏康健医疗用品，90 mm)
2. 八连管 (Life Technologies Corporation, catalog number: 4316567)
3. 量筒 (南京梅林学海生物科技有限公司，catalog number: 1601)
4. 移液枪枪头 (国产-耗材，catalog number: JWD-MTB1250-5)
5. 离心管 (康健医疗，catalog number: KJ307)
6. 玻璃棒 (上海阿拉丁生化科技股份有限公司，catalog number: g6034-05-40ea)
7. 育苗盘 (54 cm × 28 cm × 4 cm，济阳县帝悦明商贸有限公司)
8. 盆钵 (35 cm × 25 cm × 10 cm，济阳县帝悦明商贸有限公司)
   
   

二、供试菌株

野生型茄科劳尔氏菌Ralstonia solanacearum QL-Rs1115 (GenBank accession GU390462，以下简称青枯菌) 为本实验室于南京市麒麟后村发病番茄植株中分离而得，具有强的致病性 (Wei et al., 2011)。

三、化学试剂

1. D-半乳糖 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: 2202002)
2. 蜜二糖 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: dre-c14862000)
3. 蔗糖 (南京鼎思生物技术有限公司，catalog number: t3032)
4. 鼠李糖 (南京瑞翼特生物科技有限公司，catalog number: l130874-500g)
5. D-甘露醇 (南京瑞翼特生物科技有限公司，catalog number: c14752000)
6. D-核糖 (南京瑞翼特生物科技有限公司，catalog number: c16813700)
7. D-木糖 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: e1004245000)
8. D-甘露糖 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: e080274-25g)
9. 果糖 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: f792500)
10. 麦芽糖 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: 098526)
11. L-阿拉伯糖 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: e080054-500g)
12. 葡萄糖 (南京瑞翼特生物科技有限公司，catalog number: g116302-10kg)
13. 酒石酸 (北京偶合科技有限公司，catalog number: 526-83-0)
14. 琥珀酸 (南京瑞翼特生物科技有限公司，catalog number: 110-15-6)
15. 戊二酸 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: e080054-500g)
16. 乙酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: 044721)
17. 丙酮酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: 965275)
18. 反乌头酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: a189885)
19. 苹果酸 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: a0107541000)
20. 顺丁烯二酸 (北京华威锐科化工有限公司，catalog number: sm14058-2)
21. 草酸 (南京捷茂生物科技有限公司，catalog number: o16291-20mg)
22. 乳酸 (南京瑞翼特生物科技有限公司，catalog number: l108839-10kg)
23. 半乳糖醛酸 (南京鼎思生物技术有限公司，catalog number: t3043)
24. 柠檬酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: c521000)
25. 瓜氨酸 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: a070059-100g)
26. 谷氨酰胺 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: b020017-100g)
27. L-亮氨酸 (无锡必康生物工程有限公司，catalog number: 61-90-5)
28. L-丝氨酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: s270980)
29. β-丙氨酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: 044720)
30. L-甲硫氨酸 (南京捷茂生物科技有限公司，catalog number: l52980-500g)
31. L-脯氨酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: p755995)
32. L-丙氨酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: a481400)
33. L-缬氨酸 (南京金益柏生物科技有限公司，catalog number: r008858-500g)
34. L-组氨酸 (南京金益柏生物科技有限公司，catalog number: r011864-25g)
35. L-色氨酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: b673350)
36. L-苯丙氨酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: 075335)
37. 阿魏酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: f308900)
38. 水杨酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: s088125)
39. 没食子酸 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: e1000010250)
40. 邻苯二甲酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: frs-067n)
41. 苯甲酸 (南京金益柏生物科技有限公司，catalog number: r011542-10ml)
42. 丁香酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: s920025)
43. 香草酸 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: a0100155000)
44. 肉桂酸 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: a0100280250)
45. 绿原酸 (上海百灵威化学技术有限公司，catalog number: c366540)
46. 香豆酸 (南京杰汶达生物科技有限公司，catalog number: rq1324)
47. 羟基苯甲酸 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: a0100540250)
48. 咖啡酸 (南京晶格化学科技有限公司，catalog number: a0106610050)
49. 葡萄糖 (南京瑞翼特生物科技有限公司，catalog number: g116302-10kg)
50. 蛋白胨 (南京巨优科学器材有限公司，catalog number: 79662B)
51. 酵母粉 (南京沃华生物科技有限公司，catalog number: cm0019)
52. 牛肉膏 (北京华威锐科化工有限公司，catalog number: hwg56062)
53. 次氯酸钠 (南京晚晴化玻仪器有限公司，catalog number: s817439-500ml)
54. 氢氧化钠 (南京晚晴化玻仪器有限公司，catalog number: s111498-500g)
55. 甲醇 (南京晚晴化玻仪器有限公司，catalog number: m116118-4l)
56. PowerSoil DNA提取试剂盒 (Mo Bio, Carlsbad, CA, USA)
57. SYBR Premix Ex TaqTM 试剂盒 (宝生物工程有限公司, 大连)
    
    

四、培养基与缓冲液 (见溶液配方)

1. NB培养基 (Nutrient Broth)
2. M-SMSA培养基 (Modified Selective Medium South Africa)
   
   

五、植物与育苗基质

1. 番茄种子 (品种：合作903)
2. 育苗基质 (淮安农业技术发展有限公司，淮安，江苏)
   

仪器设备

1. 恒温摇床 (MIN QUAN, MQD-BIR)
2. 酶标仪 (SpectraMax M5, Sunnyvale, CA, USA)
3. -80 °C冰箱 (海尔，立式超低温保存箱，DW-86L626)
4. 移液枪 (Eppendorf Research plus)
5. 涡旋仪 (SCIENTIFIC INDUSTRIES, USA)
6. 7500 Fast Real-Time PCR系统 (Applied Biosystems, CA, USA)
7. NanoDrop (ThermoScientific, Wilmington, DE, USA)
   

软件和数据库

1. RStudio (version3.1.2)
2. IBM SPSS Statistics (version26)
3. Mothur (versionv.1.35.1)
4. QIIME (version2.0)

实验步骤