摘要:瘤胃是一个复杂的微生态系统,是反刍动物消化吸收的主要场所。体外模拟瘤胃环境发酵的方式,是探究瘤胃内微生物底物的发酵特性。本文详细介绍了瘤胃液发酵的具体步骤,包括瘤胃液的采集、培养基的配置等。目的在于通过模拟瘤胃内环境的方式研究瘤胃微生物的发酵过程与发酵特点。
材料与试剂
- 大号自封袋(南京杰汶达生物科技有限公司,中国,规格:8*12 cm)
- 血清瓶(南京金正教学仪器有限公司,中国,规格:180 ml)
- CaCl2·2H2O(国药集团化学试剂有限公司,中国,分析纯)
- MnCl2·4H2O(天津市科密欧化学试剂有限公司,中国,分析纯)
- CoCl2·6H2O(成都市科隆化学品有限公司,中国,分析纯)
- FeCl3·6H2O(南京化学试剂股份有限公司,中国,分析纯)
- NH4HCO3(天津市科密欧化学试剂有限公司,中国,分析纯)
- NaHCO3(西陇科学股份有限公司,中国,分析纯)
- Na2HPO4·12H2O(西陇科学股份有限公司,中国,分析纯)
- KH2PO4(西陇科学股份有限公司,中国,分析纯)
- MgSO4·7H2O(西陇科学股份有限公司,中国,分析纯)
- 刃天青(上海源叶生物科技有限公司,中国,FMP,75%)
- L-半胱氨酸盐酸盐(上海惠兴生化试剂有限公司,中国,含量> 99.0 %)
- NaOH(西陇科学股份有限公司,中国,分析纯)
- Na2S 9H2O(西陇科学股份有限公司,中国,分析纯)
- Menke培养基(见培养基配方)
- 二氧化碳(南京特种气体厂)
- 细颈瓶(南京金正教学仪器有限公司,中国,规格:定制(参数见图1))
- 铝盖(南京杰汶达生物科技有限公司,中国,规格:20 mm)
- 异丁基橡胶塞(北京丰美仪器公司,中国,规格:20 mm)
- 量筒(四川蜀玻集团,中国,规格:1000 ml)
- 一次性使用无菌注射器(陕西龙康鑫医疗器械有限公司,中国,规格:2 ml)
- 磁力棒(索莱宝科技有限公司,中国,规格:35 mm)
- 保温瓶(武汉苏泊尔炊具有限公司,中国,规格:2 L)
- 纱布(索莱宝科技有限公司,中国,规格:500 g)
图1:细颈瓶定制规格 仪器设备
- 微波炉(格兰仕,规格:32 L)
- 烘箱(恒宇,规格:80*80*100 cm)
- 粉碎机(皇代,规格:1000 g)
- 电子天平(英衡,量程:100 g,精度0.001 g)
- 水域恒温振荡器(天竟,规格:温度范围30~70 °C,容量115 L)
- 4 ℃冰箱(海尔,规格:温度范围2~8 °C,容量390 L)
- 磁力搅拌器(CRYSTAL,规格:转速80~1500 rpm,最大搅拌容量(水)10 L,环境温度5~40 °C)
- pH计(METTLER TOLEDO,规格:pH测量范围-2~20,pH准确度(±)0.01,温度范围-5~105 °C,温度准确度(±)0.5 °C)
- 分装仪(HKM,转速范围:0.1~350 RPM,转速精度:0.2%)
- 压力传感器(上海瑞望仪器设备有限公司,量程范围:-0.1~60 MPa)
实验步骤
Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
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