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杨树根系-真菌互作体系构建方法

Method for Constructing Poplar-root Fungus Interaction System

何 何兴华*
单 单晓亮*
彭 彭龙
袁 袁志林

*Contributed equally to this work 发表时间: 2021年04月12日 DOI: 10.21769/BioProtoc.2003659 浏览次数: 2905

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微生物组实验手册：架起各领域通向微生物组世界的桥梁
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摘要：杨树 (Populus) 是重要的造林树种，也是研究林木基础生物学性状的模式材料。此外杨树可与多种真菌 (外生菌根真菌、丛枝菌根真菌和内生真菌)类群建立共生关系。目前，在杨树-真菌互作体系中，通过构建杨树-双色蜡蘑 (Laccaria bicolor) 和卷缘桩菇 (Paxillus involutus) 互惠共生提高杨树非生物胁迫能力的生理机制方面的研究已取得多项突破，而关于杨树-根系内生真菌互作的研究较少。我们构建了杨树-根系真菌悉生共生体系，为揭示树木和根系真菌之间互惠共生机制提供理想模型。该体系能够基于不同目的使用不同培养容器来研究真菌对树木的影响，这在现有的树木-外生菌根共生体系中很少见。构建杨树-真菌互作体系是研究一系列如共生真菌侵染结构观察、互作转录组研究等生物学问题的关键，并且有助于加深理解共生真菌对林木表型和生理代谢的表观遗传学调控机制。

Keywords: 杨树 search 真菌 search 互作体系 search

材料与试剂

  1. 琼脂 (北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，DING GOU，catalog number: DH010)
  2. 葡萄糖 (上海麦克林生化科技有限公司，麦克林，catalog number: D810588)
  3. 硫酸链霉素 (GENVIEW公司，GENVIEW，catalog number: AS325)
  4. 盐酸四环素 (上海麦克林生化科技有限公司，麦克林，catalog number: D807503)
  5. NH4NO3 (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 6484522)
  6. KNO3 (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 10017218)
  7. CaCl2·2H2O (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 20011160)
  8. MgSO4·7H2O (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 10013018)
  9. KH2PO4 (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 10017618)
  10. KI (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 10017160)
  11. H3BO3 (上海麦克林生化科技有限公司，麦克林，catalog number: B802544)
  12. MnSO4·4H2O (上海沃凯化学试剂有限公司，沃凯，catalog number: B22081)
  13. ZnSO4·7H2O (Sigma公司，Sigma，catalog number: Z0251)
  14. NaMoO4·2H2O (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 10019818)
  15. CuSO4·5H2O (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 10008218)
  16. CoCl2·6H2O (Sigma公司，Sigma，catalog number: 31277)
  17. FeSO4·7H2O (国药集团化学试剂有限公司，沪试，catalog number: 10012116)
  18. Na2EDTA·2H2O (Sigma公司，Sigma，catalog number: E6635)
  19. IBA (Sigma公司，Sigma，catalog number: V9003250)
  20. 封口膜 (Polisciences Inc公司，Parafilm，catalog number: PM996)
  21. PDA培养 (见溶液配方)
  22. 土豆汁 (见溶液配方)
  23. IBA母液 (见溶液配方)
  24. 20×大量元素 (见溶液配方)
  25. 100×微量元素 (见溶液配方)
  26. 100×铁盐母液 (见溶液配方)
  27. 杨树-真菌共培养培养基 (见溶液配方)
  28. 改良MS生根培养基 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 培养箱 (上海博讯，产品型号：SPX-250B-Z)
  2. 光照培养箱 (宁波扬辉，产品型号：RDN-1500B)
  3. 立式压力蒸汽灭菌器 (上海申安，产品型号：LDZF-50KB-II)
  4. PC材料广口组培瓶 (带瓶盖，体积480 ml)
  5. 一次性塑料培养皿 (直径90 mm)

实验步骤

Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：何兴华, 单晓亮, 彭龙, 袁志林. (2021). 杨树根系-真菌互作体系构建方法. // 微生物组实验手册. Bio-101: e2003659. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003659.
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How to cite: He, X. H., Shan, X. L., Peng, L. and Yuan, Z. L. (2021). Method for Constructing Poplar-root Fungus Interaction System. // Microbiome Protocols eBook. Bio-101: e2003659. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003659.
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分类

系统生物学 > 微生物组学

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