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提取杨树人工林土壤微生物菌体细胞的4种方法

Four Methods to Eextract Soil Microbes from Poplar Plantation

王 王科选
秦 秦媛
潘 潘雪玉
靳 靳微
杨 杨预展
袁 袁志林

发表时间: 2021年04月23日 DOI: 10.21769/BioProtoc.2003656 浏览次数: 2609

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微生物组实验手册：架起各领域通向微生物组世界的桥梁
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摘要：本实验采用超声波、搅拌器2种物理方法对微生物、土壤颗粒物和团聚体等进行分散；采用焦磷酸钠、吗啉乙磺酸一水合物2种化学分散剂处理方法对土壤颗粒进行分散和预处理后，再分别通过2步离心法获得菌体样品。即将杨树人工林土壤微生物中的菌体细胞提取出来获得土壤微生物菌群。实验得出超声波、搅拌器2种物理处理分散方法和焦磷酸钠、吗啉乙磺酸一水合物2种化学分散剂方法均可提取出菌体样品。

Keywords: 杨树 search 菌体细胞提取 search 超声波 search 搅拌器 search

材料与试剂

  1. 无菌采样袋
  2. 无菌锡箔纸
  3. 定性滤纸
  4. 50 ml无菌离心管
  5. 250 ml无菌离心瓶
  6. 土壤样品
  7. 0.05 M焦磷酸钠溶液 (上海阿拉丁生化科技有限公司, Aladdin, S108847-500g, 见溶液配方)
  8. 2.5 mM吗啉乙磺酸一水合物（MES）溶液 (上海阿拉丁生化科技股份有限公司, Aladdin, M105074-25g, 见溶液配方)
  9. 0.85%的生理盐水 (见溶液配方)

仪器设备

  1. 20目筛
  2. 无菌三角瓶
  3. 超净工作台
  4. 天平
  5. 立式压力蒸汽灭菌锅 (上海申安医疗机器厂, SHENAN, LDZF-50KB-Ⅱ)
  6. 超声波细胞破碎仪 (上海净信实业发展有限公司, 净信, JY 92-Ⅱ)
  7. 搅拌器 (Waring公司, 美国Waring, 8011S)
  8. 恒温水浴振荡器 (金坛市科析仪器有限公司, 科欣仪器, SHA-B)
  9. 高速落地离心机 (赛默飞世尔科技有限公司, Thermo, LYNX 4000)
  10. 移液枪

实验步骤

Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：王科选, 秦媛, 潘雪玉, 靳微, 杨预展, 袁志林. (2021). 提取杨树人工林土壤微生物菌体细胞的4种方法. // 微生物组实验手册. Bio-101: e2003656. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003656.
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How to cite: Wang, K. X., Qin, Y., Pan, X. Y., Jin, W., Yang, Y. Z. and Yuan, Z. L.  (2021). Four Methods to Eextract Soil Microbes from Poplar Plantation. // Microbiome Protocols eBook. Bio-101: e2003656. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003656.
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分类

系统生物学 > 微生物组学

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