Low-quality DNA Extraction Method for Cultivated Minerals in Hot Springs

材料与试剂

1. 50 ml无菌离心管：Corning，catalog number: 430828
2. 200 µl、1 ml、5 ml枪头 (枪头适量扩大口径以减小剪切力对核酸的损伤，可用剪刀稍剪一下)
3. 2 ml离心管：需提前高温蒸汽灭菌 (121 °C，30 min)
4. DNA提取试剂盒：品牌QIAGEN, PowerSoil® DNA Isolation Kit强力土壤DNA提取试剂盒，catalog number: 12988-10
5. 无水乙醇：北京东方博远科技发展有限公司
6. 去离子水
7. 1 M Tris-HCl缓冲液 (pH 8.0)：品牌Solarbio，catalog number: T1150，常温保存
8. DNA提取液：苯酚:氯仿:异戊醇 (25:24:1) (pH > 7.8)，catalog number: P1012，4 °C避光保存
9. 三水合乙酸钠：西陇化工股份有限公司，catalog number: 6131-90-4 (见溶液配方)
10. 70%乙醇 (见溶液配方)
    

仪器设备

1. 离心机：
   
   1)

   品牌eppendorf, model: Centrifuge 5810R冷冻高速离心机
   2)

   品牌eppendorf，model: Centrifuge 5417R冷冻高速离心机
2. 涡旋仪：品牌Scientific Industries，model: Vortex Genie-2；水平50 ml离心管支架，catalog number: SI-H506
3. 200 µl、1 ml、5 ml 移液枪
4. 浓缩仪：品牌eppendorf，model: Concentrator plus真空离心浓缩仪
5. 水浴锅：上海一恒科技有限公司，HWS12型电热恒温水浴锅
6. 电子天平：梅特勒-托利多仪器上海公司，品牌HANGPING，model: JA2003N
7. 超净工作台：品牌苏净安泰，model: YJ-1340型
8. 通风橱：北京鸣远实验家具公司，model: MYLAB
9. 纯水仪：美国Milli-Q型号纯水仪
   

实验步骤