摘要:生物的所有代谢过程都伴随着热效应,微量热法是通过微量热仪对代谢过程的热效应进行实时、高频、精确的监测,从而无破坏地研究生物/环境样品微生物代谢过程热力学与动力学的研究手段。将适量预稳定的样品置于等温微量热仪 (TAMIII, TA Instruments, USA) 中恒温培养,监测反应过程中的热散逸,监测频率可达到每秒10次,监测精度可达纳瓦级别。
微量热曲线用于展示微生物稳定期、对数生长期的热散逸,及微生物的整体代谢特征。通过模型参数拟合,可进一步获得微生物生物量,微生物群落的潜在最大代谢活性、响应时间、比生长速率、周转速率,活性微生物比例等参数,用于表征单一微生物或微生物群落的代谢活性和代谢特征。该方法获得的结果与传统的土壤呼吸强度、土壤微生物量、qPCR以及土壤酶活等方法具有很好的相关性,可广泛用于土壤、水体、污染物等环境样品微生物代谢活性和群落功能的研究。
材料与试剂
- 枪头
- 4 ml玻璃安瓿瓶
- 安瓿瓶称量纸
- 葡萄糖
- MgSO4·7H2O
- (NH4)2SO4
- K2HPO4·3H2O
- 葡萄糖溶液 (见溶液配方)
- 硫酸镁溶液 (见溶液配方)
- 硫酸铵和磷酸氢二钾混合溶液 (见溶液配方)
仪器设备
- 移液器
- 灭菌锅
- 等温微量热仪 (TAM III, TA Instruments, USA)

图1. TAM III等温微量热仪
实验步骤
Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式:陈瑞蕊, 井忠旺, 俞冰倩, 林先贵, 冯有智. (2021). 基于微量热曲线的微生物群落代谢特征分析. // 微生物组实验手册.
Bio-101: e2003576. DOI:
10.21769/BioProtoc.2003576.
下载引用格式
How to cite: Chen, R. R., Jing, Z. W., Yu, B. Q., Lin, G. X. and Feng, Y. Z. (2021). Analysis of Microbial Community Metabolic Characteristics Based on Kinetics of Micro-heat Release. // Microbiome Protocols eBook.
Bio-101: e2003576. DOI:
10.21769/BioProtoc.2003576.
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