Improve Research Reproducibility A Bio-protocol resource

白酒酒醅非破坏性连续采集与核酸提取

Non-destructive Continuous Collection and Nucleic Acid Extraction of Baijiu Fermented Grains

王 王雪山
杜 杜海
徐 徐岩

发表时间: 2021年04月23日 DOI: 10.21769/BioProtoc.2003387 浏览次数: 2256

返回专辑目录

微生物组实验手册：架起各领域通向微生物组世界的桥梁
pdf PDF PDF
ask 提问与回复
引用
收藏
被引用
摘要：中国白酒的酿造过程是个复杂的自然多菌种固态发酵过程，涉及多种微生物的相互作用及代谢。白酒酿造环境已经成为一种我国独有的特殊生态环境，受国内外的广泛关注。本方法以浓香型白酒发酵过程为例，采用酒醅专用取样器完成酒醅发酵过程样品的非破坏性连续采集，以及酒醅宏基因组的提取及保存。提取得到的基因组满足宏基因组测序要求，对研究白酒发酵过程微生物多样性及功能有重要价值。

Keywords: 中国白酒 search 酒醅 search 样品采集 search 宏基因组提取 search

材料与试剂

  1. 枪头 (碧云天Beyotime, catalog numbers: FTIP010, FTIP200, FTIP01C)
  2. 离心管 (Nest/耐思, catalog numbers: 602052, 620011, 615001)
  3. Parafilm封口膜 (Parafilm, catalog number: PM996)
  4. 玻璃珠 (425-600 μm) (Solarbio/索莱宝, catalog number: G8080-100g)
  5. 10% SDS Solution (Macklin/麦克林, catalog number: D885207-250 ml)
  6. NaH2PO4 (国药集团化学试剂有限公司，中国，分析纯)
  7. Na2HPO4 (国药集团化学试剂有限公司，中国，分析纯)
  8. NaCl (国药集团化学试剂有限公司，中国，分析纯)
  9. Tris-HCl (pH 8.0) (Macklin/麦克林, catalog number: D885212-250 ml)
  10. 三水合乙酸钠 (Macklin/麦克林, catalog number: S817983-500 g)
  11. Tris饱和酚 (pH > 7.8) (上海源叶, catalog number: R21022-100 ml)
  12. 氯仿 (国药集团化学试剂有限公司，中国，分析纯)
  13. 异戊醇 (国药集团化学试剂有限公司，中国，分析纯)
  14. 无水乙醇 (国药集团化学试剂有限公司，中国，分析纯)
  15. RNase A (Solarbio/索莱宝, catalog number: R8021-25)
  16. DEPC水 (上海源叶, catalog number: S30710-500 ml)
  17. 琼脂糖 (BIOWEST, catalog number: 111860)
  18. 0.1 mol·L-1 PBS缓冲液 (见溶液配方)
  19. Buffer Z缓冲液 (见溶液配方)
  20. 3 mol·L-1 NaAc 溶液 (pH 5.2) (见溶液配方)

仪器设备

  1. 移液枪 (Eppendorf/艾本德, catalog number: 3120000267 3120000305 3120000224)
  2. 离心机 (Eppendorf/艾本德, model: 5804)
  3. 制冰机 (斯科茨曼, model: AF103AS)
  4. 超低温冰箱 (THERMO/赛默飞, model: ULTS1490)
  5. BeadBeater珠磨式研磨器 (Biospec, catalog number: 3110BXEUR)
  6. 电泳仪 (Bio-Rad/伯乐, catalog number: 164-5050)
  7. 凝胶成像仪 (MIULAB/米欧仪器, catalog number: GIS-500)
  8. NanoDrop 8000分光光度计 (THERMO/赛默飞, catalog number: YQ1633128264)

实验步骤

Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：王雪山, 杜海, 徐岩. (2021). 白酒酒醅非破坏性连续采集与核酸提取. // 微生物组实验手册. Bio-101: e2003387. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003387.
ris ris 下载引用格式
How to cite: Wang, X. S., Du, H. and Xu, Y. (2021). Non-destructive Continuous Collection and Nucleic Acid Extraction of Baijiu Fermented Grains. // Microbiome Protocols eBook. Bio-101: e2003387. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003387.
ris ris Download Citation in RIS Format

分类

系统生物学 > 微生物组学

您对这篇实验方法有问题吗？

在此处发布您的问题，我们将邀请本文作者来回答。同时，我们会将您的问题发布到Bio-protocol Exchange，以便寻求社区成员的帮助。

post 发布问题
0 Q&A