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小鼠粪便样本中短链脂肪酸的定量检测

Quantitative Analysis of Short-chain Fatty Acids (SCFAs) in Mouse Fecal Sample

刘 刘红宾
汤 汤锦辉
戴 戴磊

发表时间: 2020年12月25日 DOI: 10.21769/BioProtoc.2003367 浏览次数: 10249

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摘要：短链脂肪酸 (Short-chain fatty acids, SCFAs) 是肠道菌群的重要代谢产物，主要包括乙酸、丙酸和丁酸，对宿主的许多生理代谢过程具有有益的调节作用。由于以往检测方法存在操作耗时长、所需样本量大、机器批次效应偏差、前处理误差大的缺点，无法对样本中的SCFAs进行准确定量。本文通过添加内标脂肪酸的方法，可以在1.5小时内完成粪便样本的前处理手动操作，并且只需0.03 g的粪便样本，完成对十种SCFAs的定量检测。本方法可拓展至其他生物样品类型 (器官组织、微生物培养液等)，为肠道菌群代谢相关研究提供技术参考。

Keywords: 短链脂肪酸 search 气相色谱-质谱技术 search 肠道菌群 search

材料与试剂

材料：

  1. 0.6 ml离心管
  2. 气相色谱-质谱上样瓶 (Agilent, catalog number: 5181-0714)
  3. 内插管 (Agilent, catalog number: 5181-1270)
  4. 氧化锆珠子 (Biospec, catalog number: 11079110z)
试剂：
  1. SCFAs混合酸标准品 (Sigma, catalog number: CRM46975)
  2. 6,6,6-d3己酸 (cdn isotopes, catalog number: ND-3993)
  3. 无水乙醚 (上海凌峰)
  4. 无水Na2SO4 (Sigma, catalog number: 238597)
  5. 盐酸 (上海凌峰)
  6. N, O-三甲硅烷基三氟乙酰胺 (BSTFA, Sigma, catalog number: 25561-30-2)

仪器设备

  1. 涡旋振荡器 (赛默飞，Vortex-Genie 2)
  2. 低温离心机 (艾本德，5427R)
  3. 通风橱
  4. 8890-7000D GC-MS
  5. HP-5 ms色谱柱

实验步骤

Copyright: © 2020 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用格式：刘红宾, 汤锦辉, 戴磊. (2020). 小鼠粪便样本中短链脂肪酸的定量检测. // 微生物组实验手册. Bio-101: e2003367. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003367.
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How to cite: Liu, H. B., Tang, J. H. and Dai, L. (2020). Quantitative Analysis of Short-chain Fatty Acids (SCFAs) in Mouse Fecal Sample. // Microbiome Protocols eBook. Bio-101: e2003367. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003367.
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分类

生物化学 > 脂质 > 脂质测定

微生物学 > 微生物生物化学 > 脂质

微生物学 > 微生物-宿主相互作用 > 细菌

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