Long-term Real-time In Situ Cell Chemosensitivity Analysis with Label-free SPRcellyzer

材料与试剂

1. 水系针式无菌过滤器（生产商：比克曼生物，产品规格：0.22 μm，直径25 mm）
2. 无菌血清移液管（生产商：比克曼生物，规格：10 mL）
3. 11-巯基十一烷酸（简称11-MUA，生产商：欣恒研，CAS号：71310-21-9，产品编号：71310/21/9#B073089，储存条件：-20 ℃）
4. N-羟基丁二酰亚胺（简称NHS，生产商：Acmec，CAS号：6066-82-6，产品编号：H77940-100 g）
5. 11-巯基-1-十一醇（简称11-MUD，生产商：麦克林，CAS号：73768-94-2，产品编号：M823183-5g，储存条件：2~8 ℃）
6. 磷酸盐缓冲液（简称PBS， PH=7.2~7.4，生产商：麦克林，产品编号：P917710-500ml）
7. 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 （简称EDC，生产商：安耐吉 CAS号：25952-53-8， 产品编号：A010938）
8. 多聚左旋赖氨酸（简称PLL，分子量：150~300kDa，生产商：源叶，CAS号：25988-63-0，产品编号：S20056-100 mg）
9. 改良Eagle细胞培养液（简称DMEM，生产商：普诺赛，产品编号：PM150226）
10.  胎牛血清（简称FBS，生产商：麦克林，CAS号：9999-99-9，货号：M6546-25 mL）
11.  庆大霉素（生产商：欣恒研，CAS号：1403-66-3，产品编号：1403/66/3#P000391）
12. 胰蛋白酶（生产商：Acmec，CAS号：9002-07-7，产品编号：954773）
13. 顺铂（生产商：欣恒研，CAS号：15663-27-1，产品编号：15663/27/1#B024989）
14. 紫杉醇（生产商：欣恒研，CAS号：33069-62-4，产品编号：33069/62/4#L083397，储存条件：-20 ℃）
15. 无水乙醇（生产商：国药沪试）
16. 去离子水（生产商：麦克林）
17. 氯化钠（生产商：国药沪试）
18. 1 mM 11-MUA乙醇溶液配制（见溶液配方）
19. 1 mM 11-MUD乙醇溶液配制（见溶液配方）
20. 100 mM NHS溶液配制（见溶液配方）
21. 400 mM EDC溶液配制（见溶液配方）
22. 35 μg/mL PLL溶液配制（见溶液配方）
23. 0.9%氯化钠溶液配制（见溶液配方）
24. 500 μg/mL顺铂原溶液配制（见溶液配方）
25. 500 μg/mL紫杉醇原溶液配制（见溶液配方）
26. 5 mg/mL庆大霉素储存液（见溶液配方）
27.  细胞培养液配制（见溶液配方）
    

仪器设备

1. 超声清洗仪（洁盟，型号JP-010T，功率60w）
2. 离心机（Thermo Fisher Scientific Inc.，mySPIN 6）
3. CO₂培养箱（Thermo Fisher Scientific Inc.，Midi 40）
4. 氮气瓶（Air Liquide，纯度：99.9%，8L）
5. 二氧化碳气瓶（Air Liquide，纯度：5.0%，4L）
6. SPR细胞传感芯片（清华大学精密仪器系自研）
7. SPRcellyzer仪器（清华大学精密仪器系自研）
   

实验步骤