实验背景

在Polariton C5芯片表面，通过氨基偶联方法，固定GluT1蛋白作为配体，分别流过5种糖聚物的浓度梯度，检测GluT1/糖聚物相互作用。获取数据后，用Polariton SPR Workstation软件中的1:1 binding模型拟合得到6种糖聚物与GluT1蛋白的亲和力信息，为后续实现具备靶向蛋白降解（TPD）功能的糖聚物-抗体聚合物的构建提供关键数据。

材料与试剂

1. GluT1蛋白及糖聚物，合成方法参见文献1。GluT¹分子量40kD，Gal⁶、Gal⁴Glc²、Gal²Glc⁴、glc⁶分子量2.5kD，Glc²⁴分子量7kD，储存在PBS缓冲液中。糖聚物化学结构式如下图1，xy表示寡糖分子个数。如Gal⁴Glc²，即单位聚合物内，包含4个Gal分子和2个Glc分子。5种糖聚物共有结构为FITC荧光标记。
   
   
   图1 糖聚物化学结构式
   
   
2. Polariton C5芯片（极瞳生命，产品目录号：PR1011）
3. 氨基偶联试剂盒（极瞳生命，产品目录号：PR3002）
4. 缓冲液：10× HBS-T（极瞳生命，产品目录号：PR2012）
5. 10 mM pH4.0醋酸钠缓冲液（极瞳生命，产品目录号：PR2034）
6. 再生试剂：10 mM pH 2.5 Glycine-HCl（极瞳生命，产品目录号：PR2042）
7. 350 μL V底96微孔板（极瞳生命，产品目录号：PR4011）
8. 其他耗材：1.5 mL EP管，1 mL、200 μL、10 μL枪头均为Axygen公司产品。
9. 1× HBS-T（见溶液配方）
   

仪器设备

1. SPR分子互作系统（极瞳生命，仪器型号：S-CLASS）

实验步骤