Detecting the Binding Affinities Between HBO1-BRPF2 and Different acyl-CoAs by SPR Technology

材料与试剂

1. Sensor Chip CM5（Cytiva，货号：BR100530）
2. 96孔板（Greiner，货号：650101）
3. Microplate Foil 96-well（Cytiva，货号：28975816）
4. HBS buffer（实验室配制）
5. Acetate 5.0（Cytiva，货号：BR100351）
6. Acetate 5.5（Cytiva，货号：BR100352）
7. NaOH 50（Cytiva，货号：BR100358）
8. Amine Coupling Kit（Cytiva，货号：BR100050）
9. HBO1-BRPF2（原核表达，实验室亲和纯化。两种蛋白共表达时使用的是人源HBO1的催化结构域（氨基酸残基336–611）和BRPF2的N端片段（氨基酸残基31-80））
10. CoA（Merck，货号：C4282）
11. Ace-CoA（Merck，货号：A2181）
12. Pro-CoA（Merck，货号：P5397）
13. But-CoA（Merck，货号：B1508）
14. Cro-CoA（Merck，货号：28007）
15. Succ-COA（Merck，货号：S1129）
    

仪器设备

1. Biacore 8K （Cytiva，货号：29337763）
2. 微型台式真空泵（其林贝尔仪器制造有限公司，型号：GL-802A）
3. Barnstead^TM GenPure^TM Pro 水净化系统（Thermo Scientific，货号：50131952）
   

实验步骤