摘要: 体细胞克隆是指将体细胞注射到去核卵母细胞中,并进行融合构建重构胚胎,再将其移植回受体输卵管,使之发育成一个完整个体的一项技术。通过该技术获得的后代其绝大部分遗传物质完全来自于体细胞。因此,该技术可以快速获得大量优良性状的个体或是进行保种。通过探讨犬的体细胞克隆技术,可以成功实现犬优良性状个体的快速扩繁,同时也可以对体细胞进行基因编辑,再进行克隆,进而改变犬的某些性状。
材料与试剂
- 胚胎操作液(自配)
- 细胞融合液(自配)
- M199(Invitrogen)
- FBS(Gibco)
- 透明质酸酶(Sigma)
- Ionomycin(Sigma)
- 6-DMAP(Sigma)
- 矿物油(Sigma)
- 培养皿(Corning)
- 口吸管(自制)
- 玻璃针(国产)
仪器设备
- 倒置显微镜(Olympus-IX73)
- 显微操作系统(TransferMan 4r)
- CO2培养箱(Thermo-4111)
- 生物安全柜(ESCO-AC2-6S1)
- 体视显微镜(Nikon-SMZ745)
- 电融合仪(BTX-ECM2001)
实验步骤
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